DE3226407C2

DE3226407C2 - Micro-analysis capillary system

Info

Publication number: DE3226407C2
Application number: DE19823226407
Authority: DE
Inventors: Volker Dr. 6900 Heidelberg Daniel; Dieter 6806 Viernheim Renner
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1982-07-15
Filing date: 1982-07-15
Publication date: 1985-05-15
Also published as: DE3226407A1

Abstract

Das Mikro-Analyse-Kapillar-System ist ein Mikrotestsystem für qualitative und quantitative Untersuchungen von Flüssigkeiten und ihren korpuskulären Bestandteilen, insbesondere von Körperflüssigkeiten im naturwissenschaftlichen und medizinischen Bereich. Es basiert auf einer sich selbständig über Kapillarität füllenden, durchsichtigen, sterilen Kapillare mit reagenzienbeschichteter Innenwand, definiertem Volumen und planer Boden- und Deckfläche, deren Tiefe so gewählt ist, daß gegebenenfalls eine Differenzierung von einzelnen Partikeln des Untersuchungsmaterials möglich wird (monozelluläre Schicht). Mehrfachansätze können durch parallele Anordnung mehrerer Kapillaren durchgeführt werden, die mit einem gemeinsamen abtrennbaren Zulauf versehen sind, der beim Zusammendrücken der vorderen und hinteren Kappe der Schutzhülle abbricht. Ansatz und Auswertung erfolgen nach Entnahme der Probe, z.B. mittels vorgeschalteter Punktionskanüle in der Kapillare, die nach Verkittung der Enden als Schutz gegen äußere Einflüsse ein steriles geschlossenes System darstellt, umgeben von einer beschriftbaren Schutzhülle. Die Auswertung erfolgt überwiegend durch optische, mikroskopische, fluoreszenztechnische und photometrische Verfahren.The micro-analysis capillary system is a micro-test system for qualitative and quantitative analysis of liquids and their corpuscular components, in particular of body fluids in the scientific and medical fields. It is based on a transparent, sterile capillary with a reagent-coated inner wall, a defined volume and a flat bottom and top surface, the depth of which is chosen so that, if necessary, a differentiation of individual particles of the test material is possible (monocellular layer). Multiple approaches can be carried out by arranging several capillaries in parallel, which are provided with a common separable inlet, which breaks off when the front and rear caps of the protective cover are pressed together. Approach and evaluation take place after the sample has been taken, e.g. by means of a puncture cannula in the capillary which, after cementing the ends, represents a sterile closed system as protection against external influences, surrounded by a protective cover that can be labeled. The evaluation is mainly carried out using optical, microscopic, fluorescence and photometric methods.

Description

a) daß es mehrere Kapillaren (7) in solider Verbindung mit einem gemeinsamen, an einer Sollbruchstelle (11) abtrennbaren Zulauf (10),a) that there are several capillaries (7) in solid connection with a common one at a predetermined breaking point (11) separable inlet (10),

eine dem gemeinsamen Zulauf vorgeschaltete Punktionskanüle (9) unda puncture cannula (9) upstream of the common inlet and

eine Schutzhülle mit einer vorderen (12) und hinteren (13) Kappe aufweist, wobei die vordere Kapp« (12) der Seite der Kapillaren mit dem gemeinsamen Zulauf zugeordnet ist,has a protective cover with a front (12) and rear (13) cap, the front Kapp «(12) is assigned to the side of the capillaries with the common inlet,

b) daß die beiden Kappen (12, 13) z.T. mit Kitt gefüllt sind,b) that the two caps (12, 13) are partly filled with putty,

c) daß in der vorderen Kappe (12) eine als schiefe Ebene ausgebildete Stahleinlage (15) angeordnet istc) that a steel insert (15) designed as an inclined plane is arranged in the front cap (12) is

d) und daß die Schutzhülle derart bemessen ist, daß beim Verschließen der Schutzhülle durch Zusammenschieben der vorderen und hinteren Kappe der gemeinsame Zulauf (10) zusammen mit dd vorgeschalteten Punktionskanüle (9) durch Druck auf die St?^hIeinlage (15) abbricht und die Kapillarenenden mit dem Kitt aus der Schutzkappe verschlossen «erden.d) and that the protective cover is dimensioned in such a way that when the protective cover is closed by pushing the front and rear caps together, the common inlet (10) together with the puncture cannula (9) connected upstream by pressure on the St? ^The insert (15) breaks off and the capillary ends are sealed with the cement from the protective cap.

2. MTS nach Anspruch 1, gekennzeichnet durch eine Kapillarbreite von über 0,1 mm.2. MTS according to claim 1, characterized by a capillary width of over 0.1 mm.

3. MTS nach Anspruch 1 oder 2, gekennzeichnet durch eine Schutzhülle mit Etikettierungsmöglichkeit und Befestigungsclip.3. MTS according to claim 1 or 2, characterized by a protective cover with labeling option and fastening clip.

4. MTS nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die miteinander verbundenen Kapillaren aus großflächig reagenzienbeschichteten Kunststoff- oder Glasfolien bzw. -platten hergestellt sind, in die die wannenförmige Grundform der Kapillare durch Prägung, Walzung oder Ätzung eingearbeitet ist und auf die Deckschicht aufgeklebt ist.4. MTS according to claim 1, characterized in that the interconnected capillaries are made of large-area, reagent-coated plastic or glass foils or plates, into which the trough-shaped basic shape of the capillary is incorporated by embossing, rolling or etching is and is glued to the top layer.

Die Erfindung betrifft ein Mikrotestsystem nach dem Oberbegriff des Anspruchs 1.The invention relates to a micro test system according to the preamble of claim 1.

Testsysteme im naturwissenschaftlich medizinischen Bereich sollen dazu dienen, Untersuchungen von Proben (z. B. Blut) zu vereinfachen, zu beschleunigen und zu automatisieren. Außerdem können Testsysteme durch eine verbesserte Standardisierung dazu beitragen, die Exaktheit der Untersuchungsmethode zu steigern. Durch möglichst geringen Kontakt mit dem Untersuchungsmaterial soll eine Infektionsgefährdung des medizinisch-technischen Personals vermieden werden.Test systems in the scientific medical field are intended to be used to examine samples (e.g. blood) to simplify, accelerate and automate. In addition, test systems can by an improved standardization will help to increase the accuracy of the examination method. As little contact as possible with the examination material is intended to reduce the risk of infection in the medical-technical area Staff are avoided.

Herkömmliche naturwissenschaftlich-medizinische Verfahren für qualitative und quantitative Untersuchungen von Körperflüssigkeiten, u. a. beschrieben in RICK, Klinische Chemie und Mikroskopie, 1977, Springer Verlag, ISBN 3-540-08219-05. sowie L. THOMAS, Labor und Diagnose, 2. Auflage, 1983, Medizinische Verlagsgesellschaft Marburg, ISBN 3-921320-10-8, sind in der Regel äußerst personal- und materialintensiv. Von der Gewinnung des Untersuchungsmaterials bis zur Auswertung des Ansatzes sind meist eine Reihe aufwendiger und komplizierter, mit erheblichem Infektionsrisiko verbundener Arbeitsgänge notwendig. Bedingt durch eine große Anzahl von Zwischenschritten und Manipulationen sind herkömmliche Testmethoden sehr störanfällig. Der hohe Material- und Personalaufwand für dieConventional scientific-medical procedures for qualitative and quantitative examinations body fluids, including described in RICK, Clinical Chemistry and Microscopy, 1977, Springer Verlag, ISBN 3-540-08219-05. and L. THOMAS, Labor und Diagnose, 2nd edition, 1983, Medical Publishing Company Marburg, ISBN 3-921320-10-8, are in the Usually extremely labor and material intensive. From the acquisition of the test material to the evaluation of the approach are usually a number of more time-consuming and complicated, with a considerable risk of infection associated operations necessary. Due to a large number of intermediate steps and manipulations conventional test methods are very prone to failure. The high cost of materials and personnel for the

to spezialisierten, aufwendigen und komplizierten, herkömmlichen Testsysteme bringt hohe Kosten mit sich. Eine Verkleinerung der Testansätze wurde durch die Einführung von innen<;eitig reagenzienbeschichteten, durchsichtigen Mikrokapillaren mit standardisiertem Volumen erzielt (z. B. heparinisierte Kapillaren zur Hämatokritbestimmung. Verfahren zur Durchführung radioimmunologischer Analysen: DE-AS 25 30 957, QBCTM-System mit Blutbild-Mikrokapillaren von Becton-Dickinson). Für Einzeldifferenzierung von Zellen oder Partikeln sind diese jedoch nicht geeignet, da sie keine exakte Darsteiiung der einzelnen Elemente erlauben. Das Durchfluß-Zytometer gestattet als einziges Meßsystem die Erfassung einiger weniger, charakteristischer Merkmale von Zellen durch Einzelzelldifferenzierung. Diese Geräte sind aufgrund ihres großen technischen Aufwandes sehr teuer in Anschaffung und Unterhaltung und benötigen große Mengen an teueren Reagenzien, sowie zum Teil größere Mengen an Untersuchungsmaterial. Ihre Anwendbarkeit ist auf wenige spezielle Untersuchungen beschränkt Keines dieser Geräte kann Merkmale auf Leukozyten exakt im Vollblut (Erythrozyten, Leukozyten, Thrombozyten und Plasma) messen. Technisch einfach aber sehr arbeitsintensiv ist die Methode der Darstellung von Einzelzellen bzw. Partikeln mit normierten Zählkammern (z. B. Neubauer-Zählkammer), in der eine monozelluläre Schicht durch Verdünnung der Probe außerhalb der Zälilkammer erreicht wird. Keine dieser Methoden kann für sich in Anspruch nehmen, einfach und .c.:ht zu handhaben.to specialized, expensive and complicated, conventional test systems entails high costs. A reduction in the size of the test batches was achieved by introducing internally reagent-coated, transparent microcapillaries with a standardized volume (e.g. heparinized capillaries for determining hematocrit. Procedure for performing radioimmunological analyzes: DE-AS 25 30 957, QBCTM system with blood count- Becton-Dickinson microcapillaries). However, these are not suitable for individual differentiation of cells or particles, since they do not allow the individual elements to be represented exactly. The flow cytometer is the only measuring system that allows the detection of a few characteristic features of cells by individual cell differentiation. Due to their high technical complexity, these devices are very expensive to purchase and maintain and require large quantities of expensive reagents and, in some cases, larger quantities of test material. Their applicability is limited to a few specific examinations. None of these devices can accurately measure features on leukocytes in whole blood (erythrocytes, leukocytes, platelets and plasma). Technically simple but very labor-intensive is the method of representing individual cells or particles with standardized counting chambers (e.g. Neubauer counting chamber), in which a monocellular layer is achieved by diluting the sample outside the counting chamber. Neither of these methods can stand alone, easy and .c. : ht to handle.

kostengünstig und trotzdem exakt, sowie vielfältig verwendbar zu sein, mit minimalen Proben- und Reagenzienmengen auszukommen, auf einfache Art und Weise einen sterilen Testansatz zu ermöglichen (ohne Kontamination oder Infektionsrisiko für den Benutzer), wenig störanfällig zu sein und eine große Anzahl verschiedener Ansätze auf kleinstem Raum gleichzeitig zu ermöglichen. Es gibt bisher kein Testsystem mit dem es möglich wäre, mit nur 2 Arbeitsschritten (Füllen des Testsysiems mit Mikro-Vollblutmengen und. nach einer kurzen Inkubationsphase. Auswer· -i der ohne weitere Arbeitsschritte ablaufenden Reaktionsansätze) z. B. verschiedene Gruppen von Zellen im Vollblut anhand unterschiedlicher Oberflächenantigenmuster zu differen zieren.inexpensive and nevertheless exact, as well as being versatile, with minimal sample and reagent quantities get along, to enable a sterile test approach in a simple manner (without contamination or risk of infection for the user), to be less susceptible to failure and a large number of different To enable approaches in the smallest of spaces at the same time. So far there is no test system with which it is possible would be, with only 2 work steps (filling the test system with micro-whole blood amounts and. after a short Incubation phase. Evaluation without further work steps running reaction approaches) z. B. different groups of cells in whole blood based on different To differentiate surface antigen patterns.

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, bekannte Testverfahren zur qualitativen und quantitativen Untersuchung von Flüssigkeiten bzw. fester Bestandteile dieser Flüssigkeiten (insbesondere Körperflüssigkeiten) zu optimieren und zu ökonomisieren. wodurch eine Verminderung des Personal- und Materialaufwandes, der Arbeitsgänge, der Störanfälligkeit, der Gefährdung des Personals sowie der Belastung des Patienten durch Entnahme großer Mengen an Untersuchungsmaterial erzielt werden soll.The invention is based on the object of providing known test methods for qualitative and quantitative analysis of liquids or solid components of these liquids (especially body fluids) optimize and economize. causing a decrease the personnel and material costs, the work processes, the susceptibility to failure, the endangerment of the Personnel as well as the stress on the patient achieved by taking large amounts of test material shall be.

Diese Aufgabe wird erfindungsgemäß durch das im Anspruch 1 gekennzeichnete MTS gelöst. Die Vorteile dieser Erfindung gegenüber konventionellen Technologien sind erhebliche Personal- und Materialkostenein-This object is achieved according to the invention by the MTS characterized in claim 1. The advantages this invention compared to conventional technologies are considerable personnel and material costs.

sparung (Mikroansatz), vielfältige Anwendbarkeit (abhängig von Kapillarbeschichtung), Steigerung der Lagerungskapazität und Lagerungsdauer (sterile, mit allen, z. T. lyophüisierten Testreagenzien versehene Mikroansätze). Die universelle Anwendbarkeit des MTS schränkt den bislang üblichen apparativen Aufwand erheblich ein. Zusätzliche Geräte zur Auswertung des Ansatzes sind nicht unbedingt erforderlich. Allerdings läßt sich durch eire maschinelle Auswertung die Effizienz des Systems noch um ein Vielfaches steigern. Semiquantitative Untersuchungen, wie sie mit Teststreifen üblich sind, l.önnen unter Benutzung derselben Methoden mit dem MTS exakter durchgeführt werden, da das MTS ein standardisiertes Volumen gewährleistet und darüber hinaus durch Reaktionen im geschlossenen System die Störanfälligkeit verringert wird Durch photometrische Auswertung des Ansatzes kann eine erhöhte Präzision dieser Untersuchung erzielt werden. Weiterhin ist von Bedeutung, daß die Testergebnisse schneller verfügbar sind. Der Ansatz ist weitestgehend störungsunempfindl'ich (Verkeimung etc.). Das MTS ist einfach 711 handhaben. Die Kompaktheit des MTS sowie de-sen sierile Verschließbarkeit ermöglichen einen komplikationslosen Versand. Für den Ansatz werden nur minimale Mengen Untersuchungsmaterial benötigt Zusammen mit der schonenderen Gewinnung des Materials reduziert dies die Belastung des Patienten. Da das MTS nach Verkittung ein geschlossenes System darstellt wird jegliches Infektionsrisiko ausgeschlossen. Ebenso ist die Verkeimungsgefahr äußerst gering. Die Beseitigung der Probe ist auf umweltfreundliche Art und We^!se möglich. Das MTS ist technisch einfach und leicht zu handhaben, preiswert herstellbar und erspart Personalkosten. Es erlaubt aufgrund der auf ein Minimum reduzierten Arbeitsschritte, der standardisierten Reagenzienbeschichtung und des standardisierten Volumens exakte Messungen bei gleichzeitig verringerter Störanfälligkeit.Savings (micro-batch), versatile applicability (depending on capillary coating), increase in storage capacity and storage time (sterile micro-batches provided with all test reagents, some of which have been lyophilized). The universal applicability of the MTS considerably restricts the amount of equipment that has been customary up to now. Additional devices for evaluating the approach are not absolutely necessary. However, the efficiency of the system can be increased many times over by machine evaluation. Semiquantitative examinations, as are customary with test strips, can be carried out more precisely using the same methods with the MTS, since the MTS ensures a standardized volume and, in addition, reactions in the closed system reduce susceptibility to interference increased precision of this investigation can be achieved. It is also important that the test results are available more quickly. The approach is largely insensitive to interference (contamination, etc.). The MTS is easy to use 711. The compactness of the MTS and the fact that it can be closed securely enable it to be sent without complications. Only minimal amounts of test material are required for the approach. Together with the gentler extraction of the material, this reduces the stress on the patient. Since the MTS represents a closed system after cementing, any risk of infection is excluded. The risk of contamination is also extremely low. The disposal of the sample is environmentally friendly ^. se possible. The MTS is technically simple and easy to use, inexpensive to manufacture and saves personnel costs. Due to the work steps reduced to a minimum, the standardized reagent coating and the standardized volume, it allows exact measurements while at the same time reducing the susceptibility to failure.

Das MTS findet in naturwissenschaftlich-medizinischen Bereichen breite Anwendung für qualitative und quantitativ. Analysen, besonders für medizinische Diagnostik (z. B. Bestimmung der Lymphozytensubpopulationen bei Verdacht auf einen Immundefekt, HLA-B27 Bestimmung bei Morbus Bechterew Verdacht) und Therapiekontrolle, insbesondere für Untersuchungen von Körperflüssigkeiten, wie Blut. Urin. Liquor, Speichel. Fruchtwasser. Scnweiß. Magensä J^e. Drusensekrete. Galle. Sperma, Bläscheninhalt. Sputum. Wundsekrete. Ergüsse und Abszesse. Das MTS ist das ideale Testsystem zur quanititativen und qualitativen Analyse von antigenen Strukturen mit iilfe markierter, monoklonaler Antikörper. Die vielen Vorteile des MTS machen das System fCr alle Einheiten der medizinischen Versorgung, d. h. sowohl für Praxis als auch Großlaboratorien interessant und lassen daher eine große Nachfrage erwarten. The MTS is widely used in scientific and medical fields for qualitative and quantitatively. Analyzes, especially for medical diagnostics (e.g. determination of lymphocyte subpopulations if an immunodeficiency is suspected, HLA-B27 determination in ankylosing spondylitis) and therapy control, especially for examinations of body fluids such as blood. Urine. Liquor, saliva. Amniotic fluid. Snow. Gastric J ^ e. Gland secretions. Bile. Semen, vesicle contents. Sputum. Wound secretions. Effusions and abscesses. The MTS is the ideal test system for the quantitative and qualitative analysis of antigenic structures with ife marked, monoclonal Antibody. The many advantages of the MTS make the system suitable for all units of medical care, d. H. Interesting for both practice and large laboratories and therefore a high demand can be expected.

Die Erfindung wird nachstehend anhand der Zeichnungen näher erläutert.The invention is explained in more detail below with reference to the drawings.

Die Kapillare wird gebildet aus einem durchsichtigen Unterteil (1), bestehend aus einer dünnen Kunststoffoder Glasplatte, in die eine z.B. 50—100mm lange, 1,0 mm breite und 0,010 mm tiefe Wanne eingearbeitet {(geprägt, gewalzt, geätzt, etc.) ist. Die Bodenfläche der Wanne muß plan und mit der für den jeweiligen Testansatz notwendigen Reagenzienbeschichtung (2) versehen sein. Das Unterteil (1) wird mit einer ebenfalls durchsichtigen Deckschicht (3) versehen und so mit dem Unterteil verbunden, düD die Wanne überdacht und in Längsrichtung zu beiden Seiten fest verschlossen ist.The capillary is made of a transparent one Lower part (1), consisting of a thin plastic or glass plate, into which a 50--100mm long, 1.0 mm wide and 0.010 mm deep tub is incorporated {(embossed, rolled, etched, etc.). The floor area of the The tub must be flat and provided with the reagent coating (2) required for the respective test approach be. The lower part (1) is provided with a likewise transparent cover layer (3) and thus with the lower part connected, that the tub is roofed and tightly closed lengthways on both sides.

Diese Verbindung (4) kann z. B. durch Verklebung erfolgen. Es ergibt sich so ein Kapillarlumen (5), z. B. mit den Abmessungen 0,010 mm ■ 1,0 mm · 100 mm, das lediglich an Vorder- und Rückseite offen ist. Funktionell stellt der bisher beschriebene Teil eine Kapillare dar, die sich von der runden Form dadurch unterscheidet, daß Boden- und Deckfläche plan sind und dadurch eine gleichmäßige Lichtbrechung gewährleistet ist. so daß der Kapillarinhalt mit dem Mikroskop betrachtet werden kann.This connection (4) can, for. B. be done by gluing. This results in a capillary lumen (5), for. B. with the dimensions 0.010 mm ■ 1.0 mm x 100 mm, the only is open on the front and back. Functionally, the part described so far is a capillary that differs from the round shape in that the bottom and top surfaces are flat and therefore uniform Refraction is guaranteed. so that the capillary contents can be viewed with the microscope.

Die genannten Abmessungen sind geeignet, bei Untersuchung von Blutproben eine monozelluläre Schicht mikroskopisch erkennen zu lassen. Diese Form ist daher für die meisten nachstehenden Anwendungsbeispiele geeignet.The dimensions mentioned are suitable, when examining blood samples, a monocellular layer microscopically to reveal. This form is therefore for most of the following application examples suitable.

Zur Stabilisierung, zur Erleichterung des Handlings und als Schutz vor Verschmutzung und Beschädigung ist das MTS mit einer Hülle versehen. Diese besieht aus einem durchsichtigen Block (6), der mehrere, in einer Ebene angeordnete, unterschiedlich beschichtete, kombinierte MTSs (7) umgibt, den Bereich oberhalb der Meßkammer (8). die den auswertbc--. <ίη Bereich der Kapillare darstellt, jedoch freiläßt, so daß uas Objektiv des Mikroskops unmittelbar an die Deckschicht herangeführt werden kann.For stabilization, to facilitate handling and to protect against dirt and damage the MTS is provided with a cover. This consists of a transparent block (6) that contains several, in one Different coated, combined MTSs (7) arranged on the plane surrounds the area above the Measuring chamber (8). the evaluation bc--. <ίη area of the capillary represents, but leaves it free, so that uas objective of the microscope is brought directly to the cover layer can be.

Ein gemeinsamer Füllungsteil ist den kombinierten Kapillarer. (7) vorgeschaltet. Dieser besteht aus einer Punktionskanüle (9) und einem gemeinsamen Zulauf (10), der an dem Block (6) so angebracht ist, daß er beim Verschließen des MTS durch die vordere Kappe (12) an der Sollbruchstelle (11) abbricht. Der gemeinsame Füllungsteil wird beim Zusammenschieben der Kappen (Verschlußvorgang) durch Druck auf die, als schiefe Ebene ausgebildete. Stahleinlage (15) in der vorderen Kappe (12) vom Block (6) abgebrochen. Während des Verschlußvorgangs werden die Kapillarenden mit dem. in der vorderen und hinteren Kappe (12, 13) befindlichen Kitt (14). verschlossen.A common part of the filling is the combined capillary. (7) upstream. This consists of one Puncture cannula (9) and a common inlet (10) which is attached to the block (6) so that it is when Closing of the MTS with the front cap (12) breaks off at the predetermined breaking point (11). The common filling part is when pushing the caps together (closing process) by pressing on the, as crooked Level trained. Steel insert (15) in the front cap (12) broken off from the block (6). During the Closure process, the capillary ends with the. located in the front and rear cap (12, 13) Putty (14). locked.

Bis zur Füllung schüt/t ein herausnehmbarer Mittelteil (16) das MTS. Nach der Füllung wird dieser entfernt.A removable middle part covers up to the filling (16) the MTS. After filling, this is removed.

Die Schutzfunktion wird nach Verschließen durch die den Block vollständig umgebende vordere und hintere Kappe (12,13) übernommen. Vor Verschluß des MTS ist der Mittelteil (16) über seinen Einrastmechanismus (17) in dem Einrastmechanismus (19) der hinteren Kappe fixiert. Der Einrastmechanismus (21) ..m hinteren Teil des Blocks verhindert ein Zurückschieben der hinteren Kappe (13) über das Blockende hinaus. Der Einrastmechanismus (20) am vorderen Teil des Blocks verhindert nach Verschluß das Zurückschieben der vorderen Kappe (12) über das Blockvorderteil. Im unverschlossenen Zustand verhindert der Mittelteil (16) ein Zusammenschieben der beiden Kappen (12, 13). Die vordere K^ppe ist so aufgesetzt, daß sie nicht über den vorderen Einrasimechanismus (20) hinaus^ragt und zur Füllung des MTS abgenommen werden kann. Nach Füllung des MTS werden, nachdem der Mittelteil (16) herausgenommen wurde, beide Kappen (12. 13) gegeneinander geschoben und über ihre Einrastmechanismen (18,19) miteinander verbunden.The protective function is taken over after closing by the front and rear cap (12, 13) completely surrounding the block. Before the MTS is closed, the middle part (16) is fixed in the locking mechanism (19) of the rear cap via its locking mechanism (17). The locking mechanism (21) ... in the rear part of the block prevents the rear cap (13) from being pushed back over the end of the block. The locking mechanism (20) on the front part of the block prevents the front cap (12) from being pushed back over the front part of the block after it is closed. In the unlocked state, the middle part (16) prevents the two caps (12, 13) from being pushed together. The front K ^ ppe is so placed that it can not be agt ^r via the front Einrasimechanismus (20) out and removed for filling of the MTS. After filling the MTS, after the middle part (16) has been removed, both caps (12, 13) are pushed against one another and connected to one another via their latching mechanisms (18, 19).

Zur Auswertung kann diese Verbindung durch leichten Zug an beiden Kappen wieder gelöst werden, wobei die vordere Kappe (12) am Einrastmechanisinus (20) des Blockvorderteils, die hintere Kappe (13) am Einrastmechanismus (21) des Blockhinterteils arretiert wird. Im wiedergeöffneten Sustand ist dann die Sicht auf die Meßkammer (8) freigegeben. Am Ende der hinteren Kappe (13) ist ein Befestigungsclip (22) angebracht, der die Fixierung des MTS an der Kitteltasche oder amFor evaluation, this connection can be released again by pulling gently on both caps, whereby the front cap (12) on the locking mechanism (20) of the block front part, the rear cap (13) on the locking mechanism (21) of the rear part of the block is locked. In the reopened state is then the view of the Measuring chamber (8) released. At the end of the rear cap (13) a fastening clip (22) is attached, the the fixation of the MTS on the smock pocket or on the

Mikroskoptisch ermöglicht.Microscope stage enables.

Probenentnahme: Die Entnahme der zu untersuchenden Flüssigkeiten erfolgt mit herkömmlichen Methoden. Häufiges Umfüllen wird vermieden durch unmittelbar an die Entnahme anschließende Füllung des MTS. Blutproben können durch direkte Venenpunktion durch eine mit dem MTS gekoppelte, dünne Kanüle oder durch Blutentnahme aus Fingerbeere oder Ohrläppchen mittels einer Lanzette steril gewonnen werden. Durch Kapillarität wird die Probe dann aus der Kanüle oder bei Entnahme mittels Lanzette gegebenenfalls nach Verwerfen von ca. 4 Tropfen Blut (Standardisierung) in das MTS aufgenommen.Sampling: The liquids to be examined are taken using conventional methods. Frequent decanting is avoided by filling the MTS immediately after removal. Blood samples can be taken by direct venipuncture through a thin cannula or can be obtained sterile by taking blood from a fingertip or earlobe using a lancet. By The sample is then capillarity from the cannula or, if necessary, after removal with a lancet Discard about 4 drops of blood (standardization) added to the MTS.

Ansatz: Die für die Reaktion notwendigen Reagenzien, die sich als Beschichtung auf der Innenseite der Kapillare befinden (/. B. pulverisiert, lyophilisicrt. etc.) werden durch das flüssige Untersuchungsmaterial gelöst. Bei Ein- oder Mehrphasentests können die notwendigen Reagenzien zeitlich abgestuft aus ihrer Mikrover-Thrombozytenzählung:Thrombozyten werden durch Anfärbung mit Thioflavin oder Primulin dargestellt.Approach: The reagents necessary for the reaction, which are located as a coating on the inside of the capillary (/. B. powdered, lyophilized, etc.) are dissolved by the liquid test material. In the case of single or multi-phase tests, the necessary Reagents staggered in time from their micro-platelet count: platelets are represented by staining with thioflavin or primulin.

Auf immunologischem Gebiet sind unier anderem drei Prinzipien von Bedeutung: Oberflächenantigenmarkierung mit fluoreszenzfarbstoffkonjugierten Antikörpern, Zytotoxizitätstcst (HLA-Typisierung, HLA-B 27 Bestimmung) sowie Agglutinationsreaktion (Blutgruppenbestimmung). Das erste Verfahren basier», auf Anlagerung von (monoklonalen) Antikörpern, z. B. an Oberflächenantigenstrukturen von Blutzellen. Das zweite Verfahren beruht auf l.yse hervorgerufen durch Immunkomplexbindung in Verbindung mit Komplement. Die lysierten Zellen (positive Reaktion) stellen sich mit einem Farbstoff (z. B. Ethydiumbromid. Propidiumjodid) dar (unter Bhiuanregung rot). Das letztgenannte Verfahren basiert auf einer Opsonierung der Zellen (Erylhrocyten) mit Antikörpern mit anschließender Agglutination der Zellen (Blutgruppenbestimmung). Auch bei diesen Ansätzen sind die Reagenzien in lyophi-In the immunological field, among other things, three principles are important: Surface antigen labeling with fluorescent dye-conjugated antibodies, cytotoxicity test (HLA typing, HLA-B 27 determination) as well as agglutination reaction (blood group determination). The first method is based on Attachment of (monoclonal) antibodies, e.g. B. on surface antigen structures of blood cells. That The second method is based on lysis caused by binding of immune complexes in connection with complement. The lysed cells (positive reaction) present themselves with a dye (e.g. ethydium bromide, propidium iodide) dar (red under Bhiu excitation). The latter The method is based on an opsonization of the cells (Erylhrocyten) with antibodies with subsequent Agglutination of cells (blood group determination). In these approaches, too, the reagents are in lyophilized

kapselung freigesetzt werden. Nach kurzer Zeit wird 20 lisierter Form auf der Kapillarinnenwand aufgebracht.encapsulation are released. After a short time, the lized form is applied to the inner wall of the capillary.

sich eine gleichmäßige Verteilung der Reagenzien ein- Die Untersuchung von Bakterien (z. B. im Urin) kannThe examination of bacteria (e.g. in the urine) can result in an even distribution of the reagents

ebenfalls mit dem MTS erfolgen, indem eine Kapillannnenfläche zusätzlich mit einem geeigneten Nährboden beschichtet ist. Nach einer bestimmten Zeit erfolgt je nach Ausführung der Kapillare die Quantifizierung des Ansatzes durch Auszählen der mikroskopisch oder ma· kroskop'sch erkennbaren Bakterienkolonien, die sich nach einiger Zeit aus einzelnen Bakterien auf dem Nährboden gebildet haben. Die Differenzierung deralso done with the MTS by adding a capillary surface is additionally coated with a suitable nutrient medium. After a certain time takes place each after the capillary has been made, quantify the batch by counting the microscopic or ma koskop'sch recognizable bacterial colonies, which after a while from individual bacteria on the Have formed a breeding ground. Differentiating the

stellen (Diffusion). Für Blutuntersuchungen muß das MTS gegebenenfalls zusätzlich mit Antikoagulantien beschichtet werden.set (diffusion). For blood tests, the MTS may need to be additionally provided with anticoagulants be coated.

Auswertung: Ein großer Teil der Ansätze wird dann durch Farbreaktionen, z. B. selektive Anreicherung von Farbstoffen. Farbänderungen (Farbumschlag). Farbintensität. Farbdifferenzierung durch zwei oder mehrere Farben, entweder mit dem bloßen Auge, mikroskopisch oder auch masche .Hl ausgerwertet. Weitere Auswertungsprinzipien beruhen auf morphologischen Kriterien. Streulichtmessung, Extinktion, u. a. Die Vielfalt der einzelnen mit dem MTS durchführbaren Testverfahren gestattet keine umfassende Darstellung Bakterien kann u a. durch Selektivnährböden oder über fluoreszenzfarbstoffkonjugierte (monoklonal) Antikörper erfolgen. Als Ergänung zu diesen Untersuchungen kann sofort ein Antibiogramm, z. B. mit antibiotikabeschichteten Kapillaren oder mikroverkapselten An-Evaluation: A large part of the approaches is then through color reactions, e.g. B. selective enrichment of Dyes. Color changes (color change). Color intensity. Color differentiation by two or more Colors, evaluated either with the naked eye, microscopically or mesh. Further evaluation principles are based on morphological criteria. Scattered light measurement, absorbance, etc. The variety of the individual test procedures that can be carried out with the MTS does not allow a comprehensive presentation Bacteria can include through selective culture media or through fluorescent dye-conjugated (monoclonal) antibodies take place. As a supplement to these examinations, an antibiogram, e.g. B. with antibiotic coated Capillaries or microencapsulated

an dieser Stelle. Häufige Anwendungsmöglichkeiten 35 tiobiotika in Verbindung mit mikroverkapselten Farbwej-den im folgenden kurz erläutert. stoffen erstellt werden. Ein Vergleich des ersten Ansat-at this point. Frequent uses 35 tiobiotics in connection with microencapsulated colored bags briefly explained below. substances are created. A comparison of the first approach

t-ür einen ieii der Biutuntersuchungen mit dem Ziel der Zelldifferenzierungen ersetzt das MTS den konventionellen Blutausstrich.For a ieii of the blood examinations with the aim the cell differentiation, the MTS replaces the conventional blood smear.

Leukozytenzählung:White blood cell count:

zes mit der negativen Kontrolle (antibiotikafrei) gesiaitet eine Aussage über die Sensibilität der Bakterien auf das untersuchte Antibiotikum.tied with the negative control (antibiotic-free) a statement about the sensitivity of the bacteria to the examined antibiotic.

Klinisch-chemische Untersuchungen von löslichen Substanzen in (Körper-) Flüssigkeiten (z. B. Glucose, Enzyme, Hormone, etc.), die bisher vor allem photometrisch in einer Küvette erfolgten, können mit dem MTS unter Verwendung wesentlich kleinerer Porbenmengen.Clinical-chemical investigations of soluble substances in (body) fluids (e.g. glucose, Enzymes, hormones, etc.), so far mainly photometric in a cuvette can be done with the MTS using much smaller quantities of porben.

Eine mit Acridincrange be-One with acridine cream

schichtete Kapillare wird mit Blut gefüllt. Acridinorangelayered capillary is filled with blood. Acridine orange

verbindet sich mit der Desoxyribonukleinsäure (DNS)connects to deoxyribonucleic acid (DNA)

der vitalen kernhaltigen Blutzellen (Leukozyten), wasof the vital nucleated blood cells (leukocytes), what

immunfluoreszenzoptisch bei Anregung im Blaubereichimmunofluorescence optical with excitation in the blue range

als Grünfluoreszenz der Kerne imponiert und mit dem 45 eventuell nach Abzentrifugieren. einfacher durchge-impressed as green fluorescence of the nuclei and with the 45 possibly after centrifugation. easier through

Auge mikroskopisch unter genügender Vergrößerung führt werden. Dies gilt besonders für Verfahren, die gegenwärtig semiquantitativ mit Teststreifen durchgeführt werden. Ein Teil der Ansätze kann bei Farbreaktionen auch mit dem Auge abgelesen werden (z. B. Urin-50 ph mit dem Indikator Phenolphthalein und Lacknr s).Eye microscopically under sufficient magnification. This is especially true for procedures currently underway can be carried out semiquantitatively with test strips. Some of the approaches can result in color reactions can also be read by eye (e.g. urine-50 ph with the indicator phenolphthalein and varnish no s).

erkennbar ist. Das Auszählen der Zellen wird so ermöglicht. Die ermittelte Zellzahl gestattet bei definiertem Volumen der Zählkammer einen Rückschluß auf die Leukozytenkonzentration im Blut. Es bietet sich auch eine maschinelle Auswertung über eine Messung der Lichtintensität an. Eine Färbung mit herkömmlichen Reagenzien (PAPPENHEIM) gestattet auch eine Auswertung mit dem Lichtmikroskop.is recognizable. This enables the cells to be counted. With a defined volume of the counting chamber, the determined number of cells allows conclusions to be drawn about the White blood cell count in the blood. There is also a machine evaluation via a measurement of the Light intensity on. Staining with conventional reagents (PAPPENHEIM) also allows evaluation with the light microscope.

Erythrozytenzählung: In derselben Probe lassen sich mit geringem Aufwand auch andere Blutzellen, insbesondere Erythrozyten, aufgrund morphologischer Kriterien und/oder durch Färbung (HAYEM) zählen.Erythrocyte counting: In the same sample, other blood cells, especially Count erythrocytes based on morphological criteria and / or by staining (HAYEM).

Hämatokrit- und Hämoglobinbestimmung: Durch Abzentrifugieren des MTS läßt sich anschließend eine eo Zeil-Plasma-Separation erreichen, die für die Hämatokritbestimmung verwertet werden kann. Eine Bestimmung des Hämoglobingehaltes erfolgt in derselben Probe photospektrometrisch. Aus diesen Werten lassen sich abgeleitete Größen, wie die miniere korpuskulare Hämoglobinkonzentration (HbE, MCH), die mittlere Hb-Konzentration (MCHC) und das mittlere korpuskulare Volumen (MCV) berechnen.Determination of hematocrit and hemoglobin: An eo Achieve cell plasma separation required for hematocrit determination can be recovered. The hemoglobin content is determined in the same sample photospectrometric. Variables such as the minimal corpuscular hemoglobin concentration can be derived from these values (HbE, MCH), the mean Hb concentration Calculate (MCHC) and mean corpuscular volume (MCV).

Hierzu 2 Blatt ZeichnungenFor this purpose 2 sheets of drawings

Claims

Patent claims:

1. Micro test system (MTS) for qualitative and quantitative studies of fluids, especially body fluids, e.g. B. on hematological, immunological, microbiological and clinical-chemical area with at least one inside reagent-coated capillary with a defined volume, characterized in that