CN101228113A - 替加环素及制备9-氨基米诺环素的方法 - Google Patents

替加环素及制备9-氨基米诺环素的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN101228113A
CN101228113A CNA2006800269628A CN200680026962A CN101228113A CN 101228113 A CN101228113 A CN 101228113A CN A2006800269628 A CNA2006800269628 A CN A2006800269628A CN 200680026962 A CN200680026962 A CN 200680026962A CN 101228113 A CN101228113 A CN 101228113A
Authority
CN
China
Prior art keywords
formula
compound
hydrogen
reaction mixture
tigecycline
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CNA2006800269628A
Other languages
English (en)
Inventor
L·克里什楠
P-E·萨姆
S·戴格诺尔特
M·贝纳池茨
A·S·皮尔彻
J·M·雷纳
A·J·图佩
J·J·麦考雷
A·P·米朔德
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Wyeth LLC
Original Assignee
Wyeth LLC
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Wyeth LLC filed Critical Wyeth LLC
Publication of CN101228113A publication Critical patent/CN101228113A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C231/00—Preparation of carboxylic acid amides
    • C07C231/12—Preparation of carboxylic acid amides by reactions not involving the formation of carboxamide groups
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C231/00—Preparation of carboxylic acid amides
    • C07C231/02—Preparation of carboxylic acid amides from carboxylic acids or from esters, anhydrides, or halides thereof by reaction with ammonia or amines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/24—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a ring other than a six-membered aromatic ring of the carbon skeleton
    • C07C237/26—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a ring other than a six-membered aromatic ring of the carbon skeleton of a ring being part of a condensed ring system formed by at least four rings, e.g. tetracycline
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2603/00—Systems containing at least three condensed rings
    • C07C2603/02—Ortho- or ortho- and peri-condensed systems
    • C07C2603/40—Ortho- or ortho- and peri-condensed systems containing four condensed rings
    • C07C2603/42—Ortho- or ortho- and peri-condensed systems containing four condensed rings containing only six-membered rings
    • C07C2603/44—Naphthacenes; Hydrogenated naphthacenes
    • C07C2603/46—1,4,4a,5,5a,6,11,12a- Octahydronaphthacenes, e.g. tetracyclines

Abstract

公开了制备和纯化四环素类、例如替加环素的方法。本发明还公开了通过这些方法制备的四环素类组合物、例如替加环素组合物。

Description

替加环素及制备9-氨基米诺环素的方法
本申请要求于2005年5月27日提交的美国临时申请60/685,146的权益，该文献的内容引入本文作为参考。
本文公开了制备至少一种式1化合物或其可药用盐的方法，
其中R1和R2各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C6)烷基以及环烷基，或者R1和R2与N一起形成杂环；R为-NR3R4，其中R3和R4各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C4)烷基；且n为1-4。
在一项实施方案中，R1为氢，R2为叔丁基，R为-NR3R4，其中R3为甲基且R4为甲基，且n为1，例如替加环素(tigecycline)。替加环素，(9-(叔丁基-甘氨酰氨基)-米诺环素，TBA-MINO)，(4S，4aS，5aR，12aS)-9-[2-(叔丁基氨基)乙酰氨基]-4，7-双(二甲基氨基)-1，4，4a，5，5a，6，11，12a-八氢-3，10，12，12a-四羟基-1，11-二氧代-2-并四苯甲酰胺，其中R1为氢，R2为叔丁基，R3为甲基，R4为甲基，且n为1。替加环素是甘氨酰环素抗生素，并且是半合成四环素——米诺环素——的类似物。替加环素是米诺环素的9-叔丁基甘氨酰氨基衍生物，如下述结构所示：
Figure S2006800269628D00012
替加环素
替加环素是响应于对抗生素出现耐药性的世界性威胁而研发的。替加环素具有被扩展的体外及体内广谱抗菌活性。甘氨酰环素抗生素象四环素抗生素那样通过抑制细菌中的蛋白质翻译来起作用。
替加环素是四环素家族中已知的抗生素，并且是米诺环素的化学类似物。其可用作对抗耐药性细菌的治疗，并且其在其它抗生素无效的情况下已经显示出有作用。例如，其具有对抗下述的活性：耐甲氧苯青霉素金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、耐青霉素肺炎链球菌(Streptococcuspneumoniae)和耐万古霉素肠球菌(enterococci)(D.J.Beidenbach等人，Diagnostic Microbiology and Infectious Disease 40：173-177(2001)；H.W.Boucher等人，Antimicrobial Agents&Chemotherapy 44：2225-2229(2000)；P.A.Bradford Clin.Microbiol.Newslett.26：163-168(2004)；D.Milatovic等人，Antimicrob.Agents Chemother.47：400-404(2003)；R.Patel等人，Diagnostic Microbiology and Infectious Disease 38：177-179(2000)；P.J.Petersen等人，Antimicrob.Agents Chemother.46：2595-2601(2002)；和P.J.Petersen等人，Antimicrob.Agents Chemother.43：738-744(1999))，并且具有对抗携带四环素耐药性的两种主要形式——外流和核糖体保护——之一的生物体的活性(C.Betriu等人，Antimicrob.Agents Chemother.48：323-325(2004)；T.Hirata等人，Antimicrob.Agents Chemother.48：2179-2184(2004)；和P.J.Petersen等人，Antimicrob.Agents Chemother.43：738-744(1999))。
替加环素可用于治疗多种细菌感染，例如复杂性腹腔内感染(cIAI)、复杂性皮肤及皮肤结构感染(cSSSI)、社区获得性肺炎(CAP)和医院获得性肺炎(HAP)征候，其可由革兰氏阴性和革兰氏阳性病原体、厌氧菌以及对甲氧苯青霉素敏感的和对甲氧苯青霉素有耐药性的金黄色葡萄球菌菌株(MSSA和MRSA)引起。此外，替加环素可用于治疗或控制温血动物中由具有TetM及TetK耐药性决定子的细菌引起的细菌感染。而且，替加环素可用于治疗骨和关节感染、与导管有关的中性白细胞减少症、产科及妇科感染或者用于治疗其它耐药性病原体如VRE、ESBL、肠的、快速生长的分枝杆菌等。
替加环素具有一些缺点，即可能通过差向异构化而降解。差向异构化通常是四环素类已知的降解途径，虽然降解速率可以随四环素的不同而改变。比较而言，替加环素的差向异构化可能是快速的，即使例如在稍微酸性的条件和/或稍微升高的温度下亦如此。有关四环素的文献报道了数种已经被科学家尝试并使得四环素类的差向异构体形成最小化的方法。在一些方法中，当在碱性pH下、在非水溶液中进行时，与四环素类形成钙、镁、锌或铝金属盐限制了差向异构体的形成(Gordon，P.N，Stephens Jr，C.R.Noseworthy，M.M.Teare，F.W.英国专利901,107)。在其它方法中(Tobkes，美国专利4,038,315)，金属复合物的形成在酸性pH下进行，随后制备药物的稳定固体形式。
替加环素仅仅在一个方面在结构上区别于其差向异构体。
Figure S2006800269628D00031
式I       式II
在替加环素中，4号碳上的N-二甲基相对于相邻的氢为顺式，如上文式I中所示，而在差向异构体(即C4-差向异构体)式II中，它们以所示的方式相互为反式。虽然据信替加环素差向异构体是无毒的，但是在某些条件下其可能缺乏替加环素的抗菌功效，因此可以是不希望的降解产物。而且，当大规模合成替加环素时，差向异构化的量可能被放大。
减少差向异构体形成的其它方法包括：在加工期间维持pH高于约6.0；避免与弱酸共轭物如甲酸根、乙酸根、磷酸根或硼酸根接触；和避免与潮湿、包括基于水的溶液接触。关于防潮，Noseworthy和Spiegel(美国专利3,026,248)以及Nash和Haeger(美国专利3,219,529)已经提出在非水溶媒中配制四环素类似物，以提高药物稳定性。然而，在这些公开文献中所包括的溶媒大都更适合于局部使用胜于胃肠道外使用。四环素差向异构化还已知是温度依赖性的，因此在低温下生产和储存四环素类也可以降低差向异构体形成的速率(Yuen，P.H.Sokoloski，T.D.J.Pharm.Sci.66：1648-1650，1977；Pawelczyk，E.Matlak，B，Pol.J.Pharmacol.Pharm.34：409-421，1982)。已经将这些方法中的一些尝试用于替加环素，但是显然没有一种成功地降低差向异构体形成及氧化降解两者并且未引入额外的降解物(degradants)。例如，发现金属络合作用通常在碱性pH下对差向异构体形成或降解几乎没有影响。
虽然磷酸盐、乙酸盐和柠檬酸盐缓冲液的使用提高了溶液状态的稳定性，但是它们似乎加速了替加环素在冷冻干燥状态下的降解。但是，即使没有缓冲液，差向异构化对替加环素而言比对其它四环素类如米诺环素而言更为严重。
除了C4-差向异构体，其它杂质包括氧化副产物。这些副产物中的一些通过分子的D环(为氨基苯酚)氧化获得。式3化合物(参见下述流程I)在C-11和C-12a位置可容易地被氧化。采用非溶剂沉淀法分离式3化合物可具有氧化副产物和金属盐与产物共沉淀、导致纯度非常低的问题。式3化合物的核的氧化和降解在碱性反应条件下可更明显，并且在大规模操作时，由于加工时间通常较长以及化合物与碱接触更长时间，因而氧化和降解更为明显。
而且，在流程的每个不同合成步骤期间都可能获得降解产物，并且使所需化合物与这些降解产物分离可以是冗长乏味的。例如，常规纯化技术(例如硅胶色谱法或制备型HPLC)由于其螯合特性不能用于容易地纯化这些化合物。虽然已经通过采用硅藻土柱浸润含有多价螯合剂如EDTA的缓冲固定相的分配色谱法纯化了一些四环素，但是这些技术的分离度、重现性和生产力非常低。这些缺点可以妨碍大规模合成。HPLC也已经用于纯化，但是各种组分在HPLC柱子上的足够分离度要求流动相中存在离子对试剂。将终产物与流动相中的多价螯合剂和离子对试剂分离可以是困难的。
虽然在小规模中，通过沉淀获得的不纯化合物可通过制备型反相HPLC来纯化，但是当处理公斤级的材料时，通过反相液相色谱法进行纯化是效率低的和昂贵的。
因此，仍然需要以比以往更纯的形式获得至少一种式1化合物。同样需要一种新的合成法以使得以纯化为目的的色谱法使用最小化。
本文公开了四环素类如替加环素的生产方法，大致如下文流程I所解释的那样：
Figure S2006800269628D00051
流程I
R1和R2各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C6)烷基以及环烷基，或者R1和R2与N一起形成杂环；且R为-NR3R4，其中R3和R4各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C4)烷基；且n为1-4。
式2化合物也已知为米诺环素或米诺环素衍生物。式2化合物与至少一种硝化剂反应，产生-NO2取代基，从而形成式3化合物。式3中的-NO2取代基随后可以被还原为氨基，例如通过氢化还原为氨基，以形成式4化合物。最后，式4化合物酰化，产生式1化合物。
本文公开了进行反应以产生式1化合物的方法，例如硝化、还原和酰化反应。本文还公开了纯化式1化合物的方法。
本文所公开的方法可形成所需产物，并且减少终产物中存在的至少一种杂质的量，例如差向异构体形成、起始反应物的存在和氧化副产物。杂质的这种减少可以在合成的至少一个阶段期间、即在硝化、还原和酰化反应任一者期间达成。本文所公开的方法也使得大规模合成具有适宜纯度的终产物变得容易。
附图
图1描述了制备替加环素的示例性流程。
图2描述了制备替加环素的示例性流程。
图3描述了制备替加环素的示例性流程。
定义
应注意的是，如本说明书和所附的权利要求中所用的单数形式“一个”、“一种”和“该”等包括复数称谓，本文有清楚的指示除外。因此，例如，对含有“该化合物”的组合物的称谓包括两种或多种化合物的混合物。还应当注意，术语“或(者)”通常以包括“和/或”的含义被采用，本文有清楚的指示除外。
如本文所用的“替加环素”包括游离碱形式和盐形式的替加环素，例如任意可药用的盐、对映异构体和差向异构体。如本文所用的替加环素可根据本领域已知的方法来配制。
如本文所用的“化合物”指中立(neutral)的化合物(例如游离碱)及其盐(例如可药用盐)。化合物可以以无水形式存在，或者作为水合物或作为溶剂化物存在。化合物可以以立体异构体(例如对映异构体和非对映异构体)的形式存在，并且可以分离为对映异构体、外消旋混合物、非对映异构体及其混合物。固体形式的化合物可以以各种结晶形式和非晶形形式存在。
如本文所用的“可药用”指在合理的医学判断范畴内适用于与患者的组织接触而没有过度的毒性、刺激性、过敏反应或其它与合理的风险/利益比相称的问题或并发症的那些化合物、物质、组合物和/或剂量形式。
如本文所用的“环烷基”指具有3至6个环成员的饱和碳环环系。
如本文所用的“杂环”指含有至少一个氮环成员且每个环具有3至6个环成员的单环杂环基，其中每个环是饱和的或者不是另外被取代的。
硝化
一项实施方案公开了制备至少一种式1化合物或其可药用盐的方法，
其中R1和R2各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C6)烷基以及环烷基，或者R1和R2与N一起形成杂环；R为-NR3R4，其中R3和R4各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C4)烷基；且n为1-4。
一项实施方案公开了其中未分离硝化产物的硝化反应。因此，在一项实施方案中，该方法包括：
(a)使至少一种硝化剂与至少一种式2化合物或其盐反应，以生成包含中间体的反应混合物；
Figure S2006800269628D00071
和
(b)进一步使中间体反应，以形成所述的至少一种式1化合物。
在一项实施方案中，中间体未从反应混合物中分离出。
所述的至少一种式2化合物可以以游离碱或盐形式提供。在一项实施方案中，所述的至少一种式2化合物为盐。如本文所用的“盐”可原位制备或通过使游离碱与适宜的酸反应来单独地制备。示例性的盐包括但不限于盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、磷酸盐、硝酸盐、硫酸盐、乙酸盐、苯甲酸盐、柠檬酸盐、半胱氨酸盐、富马酸盐、乙醇酸盐、马来酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、硫酸盐和氯苯磺酸盐。在另一项实施方案中，盐可以选自烷基磺酸盐和芳基磺酸盐。在一项实施方案中，所述的至少一种式2化合物以盐酸盐或硫酸盐的形式提供。
如本文所用的“硝化剂”指可以给化合物加上-NO2取代基或者可以将现有取代基转化为-NO2取代基的试剂。示例性的硝化试剂包括硝酸和硝酸盐，例如碱金属盐，例如KNO3。当硝化剂为硝酸时，硝酸的浓度可以为至少80％，例如85％、88％、90％、95％、99％或甚至是100％。
硝化剂可以在任意被本领域技术人员视为适宜的溶剂中与所述的至少一种式2化合物反应。在一项实施方案中，反应在硫酸和/或硫酸盐的存在下进行。在一项实施方案中，所用的硫酸为浓的硫酸，例如浓度为至少50％、60％、70％、80％、85％、90％或至少95％。
在一项实施方案中，所述的至少一种硝化剂相对于所述的至少一种式2化合物而言以摩尔过量提供。适宜的摩尔过量可由本领域技术人员来决定，可以包括但不限于诸如至少1.05的值，例如摩尔过量为1.05至1.75当量，例如摩尔过量为1.05至1.5当量、1.05至1.25当量或者1.05至1.1当量。在另一项实施方案中，摩尔过量为1.05、1.1、1.2、1.3或1.4当量。
在一项实施方案中，通过历经一段时间加入所述的至少一种硝化剂来使所述的至少一种硝化剂与所述的至少一种式2化合物反应。本领域技术人员可以确定硝化剂总量加入的时间段以使反应条件最优化。例如，硝化试剂的添加可通过例如HPLC来监测，以控制所述至少一种硝化剂的用量。在一项实施方案中，所述至少一种硝化剂的总量历经至少1小时的时间段、例如至少2小时、至少3小时、至少5小时、至少10小时、至少24小时的时间段或者1小时至1周、1小时至48小时、1小时至24小时、1小时至12小时的时间段加入。
所述的至少一种硝化剂可以被连续地加入。
在一项实施方案中，硝化剂可与所述的至少一种式2化合物在0至25℃、例如5至15℃、5至10℃或10至15℃的温度下反应。
如本文所用的“中间体”指在原料和终产物之间作为中间产物形成的化合物。在一项实施方案中，中间体为所述至少一种式2化合物硝化的产物。例如，中间体可以为至少一种式3化合物或其盐。
Figure S2006800269628D00081
中间体可以以游离碱或盐、例如本文公开的任意盐的形式存在。在一项实施方案中，中间体为硫酸盐。
在一项实施方案中，中间体未从反应混合物中分离出。如本文所用的“反应混合物”指包含反应物之间的化学反应的至少一种产物以及副产物如杂质(包括具有所不希望的立体化学的化合物)、溶剂和任意残余的反应物如原料的溶液或浆状液。在一项实施方案中，中间体为硝化产物且存在于反应混合物中，反应混合物还可以含有起始反应物(例如硝化剂和/或至少一种式2化合物)、副产物(例如式2或式3的C4-差向异构体)。在一项实施方案中，反应混合物为浆状液，其中浆状液可以是包含至少一种固体和至少一种液体(例如水、酸或溶剂)的组合物，例如固体的混悬液或分散液。
在一项实施方案中，硝化反应产生中间体，同时产生低量的相应C4-差向异构体。例如，当中间体为所述的至少一种式3化合物时，硝化导致以如高效液相色谱法(HPLC)所测定的低于10％的量形成式3的C4-差向异构体。在另一项实施方案中，C4-差向异构体的存在量低于5％、低于3％、低于2％、低于1％或低于0.5％。
各步骤即硝化、还原和酰化的HPLC参数在实施例章节中有提供。
在一项实施方案中，进行硝化反应以便原料如所述的至少一种式2化合物的量是低的。在一项实施方案中，所述的至少一种式2化合物在硝化产物中的存在量低于10％，如通过HPLC所测定的，或者低于5％、低于3％、低于2％、低于1％或低于0.5％。
在一项实施方案中，硝化可以大规模地进行。在一项实施方案中，“大规模”指使用至少1克式2化合物，例如使用至少2克、至少5克、至少10克、至少25克、至少50克、至少100克、至少500克、至少1kg、至少5kg、至少10kg、至少25kg、至少50kg或至少100kg。
在一项实施方案中，该还原反应形成至少一种式4化合物或其盐，
Figure S2006800269628D00091
在一项实施方案中，(b)中的进一步反应包括使中间体还原。在另一项实施方案中，该方法进一步包括使还原的中间体进行酰化。
本文公开的另一项实施方案是制备至少一种式1化合物或其可药用盐的方法，
Figure S2006800269628D00101
其中R1为氢，R2为叔丁基，R为-NR3R4，其中R3为甲基且R4为甲基，且n为1，
该方法包括：
(a)使至少一种硝化剂与至少一种式2化合物或其盐反应，以生成包含中间体的反应混合物，
Figure S2006800269628D00102
和
(b)进一步使中间体反应，以形成所述的至少一种式1化合物。
在一项实施方案中，中间体未从反应混合物中分离出。
在一项实施方案中，所述的至少一种式1化合物为替加环素。
本文公开的另一项实施方案是制备至少一种式1化合物或其可药用盐的方法，
其中R1和R2各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C6)烷基以及环烷基，或者R1和R2与N一起形成杂环；R为-NR3R4，其中R3和R4各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C4)烷基；且n为1-4，
该方法包括：
(a)使至少一种硝化剂与至少一种式2化合物或其盐反应，以产生浆状液，
Figure S2006800269628D00111
和
(b)进一步使浆状液反应，以形成所述的至少一种式1化合物。
在一项实施方案中，R1为氢，R2为叔丁基，R为-NR3R4，其中R3为甲基且R4为甲基，且n为1。在另一项实施方案中，所述的至少一种式1化合物为替加环素。
本文公开的另一项实施方案是制备至少一种式3化合物或其盐的方法，
Figure S2006800269628D00112
其中R为-NR3R4，其中R3和R4各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C4)烷基，
该方法包括：使至少一种硝化剂与至少一种式2化合物或其盐反应，
Figure S2006800269628D00113
其中该反应在5至15℃的温度下进行。
本文公开的另一项实施方案是制备至少一种式1化合物或其可药用盐的方法，
Figure S2006800269628D00114
其中R1和R2各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C6)烷基以及环烷基，或者R1和R2与N一起形成杂环；R为-NR3R4，其中R3和R4各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C4)烷基；且n为1-4，
该方法包括：
(a)使至少一种硝化剂与至少一种式2化合物或其盐反应，以生成包含中间体的反应混合物；和
Figure S2006800269628D00121
(b)进一步使中间体反应，以形成所述的至少一种式1化合物。
其中(a)的反应在5至15℃的温度下进行。
在一项实施方案中，R1为氢，R2为叔丁基，R3为甲基，R4为甲基，且n为1。
还原
一项实施方案公开了制备至少一种式4化合物或其盐的方法，
Figure S2006800269628D00122
其中R＝-NR3R4，其中R3和R4各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C4)烷基，
该方法包括：使至少一种还原剂与反应混合物、例如反应混合物浆状液合并，所述反应混合物包含由至少一种硝化剂和至少一种式2化合物或其盐之间的反应制备的中间体，
Figure S2006800269628D00131
在一项实施方案中，该方法描述了“单罐”方法，其中硝化和还原步骤在未从硝化反应混合物中分离出硝化产物的情况下进行。
在一项实施方案中，R1为氢，R2为叔丁基，R3为甲基，R4为甲基，且n为1。
如本文所用的“还原剂”指给化合物增加氢的化学物质。在一项实施方案中，还原剂为氢气。还原可以在如本领域技术人员所确定的适宜压力的氢气氛围中进行。在一项实施方案中，氢气以1至75psi的压力、例如1至50psi的压力或1至40psi的压力提供。
在另一项实施方案中，还原剂在至少一种催化剂的存在下被提供。示例性的催化剂包括但不限于稀土金属氧化物、含有第VIII族金属的催化剂以及含有第VIII族金属的催化剂的盐。含有第VIII族金属的催化剂的实例为钯，例如披钯炭。
当催化剂为披钯炭时，在一项实施方案中，催化剂相对于在与所述至少一种硝化剂反应前所存在的所述至少一种式2化合物的量而言以0.1份至1份的量存在。
在一项实施方案中，中间体为至少一种式3化合物。在一项实施方案中，在式3化合物中，R1为氢，R2为叔丁基，R3为甲基，R4为甲基，且n为1。
本领域技术人员可以确定适于还原反应的溶剂。在一项实施方案中，在合并之前，例如在还原反应之前，将反应混合物与包含至少一种(C1-C8)醇的溶剂合并。所述的至少一种(C1-C8)醇可以选自例如甲醇和乙醇。
本领域技术人员可以确定适于还原反应的温度。在一项实施方案中，合并、例如还原在0℃至50℃、例如20℃至40℃或26℃至28℃的温度下进行。
在一项实施方案中，在合并之后，例如在还原反应之后，将所得反应混合物加入溶剂系统中或与之合并，所述溶剂系统包含(C1-C8)支链醇和(C1-C8)烃。在一项实施方案中，(C1-C8)支链醇为异丙醇。在一项实施方案中，(C1-C8)烃选自己烷、庚烷和辛烷。
在一项实施方案中，在合并之后，例如在还原反应之后，将所得反应混合物在0℃至50℃、例如0℃至10℃的温度下加入溶剂系统中。
在一项实施方案中，该方法进一步包括以固体或固体组合物的形式分离所述的至少一种式4化合物。在一项实施方案中，所述的至少一种式4化合物以盐、例如本文描述的任意盐形式被沉淀或分离出。
在一项实施方案中，固体组合物以如通过高效液相色谱法所测定的低于10％的量包含式4的C4-差向异构体。在另一项实施方案中，C4-差向异构体以低于5％、低于3％、低于2％、低于1％或低于0.5％的量存在。
在一项实施方案中，固体组合物以如通过高效液相色谱法所测定的低于2％的量、例如低于1％或低于0.5％的量包含所述的至少一种式2化合物。
在一项实施方案中，还原可以大规模地进行。在一项实施方案中，“大规模”指使用至少1克式2化合物，例如使用至少2克、至少5克、至少10克、至少25克、至少50克、至少100克、至少500克、至少1kg、至少5kg、至少10kg、至少25kg、至少50kg或至少100kg。
本文公开的另一项实施方案是制备至少一种式1化合物或其可药用盐的方法，
Figure S2006800269628D00141
其中R1和R2各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C6)烷基以及环烷基，或者R1和R2与N一起形成杂环；R为-NR3R4，其中R3和R4各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C4)烷基；且n为1-4，
该方法包括：
(a)使至少一种还原剂与反应混合物、例如反应混合物浆状液合并，所述的反应混合物包含由至少一种硝化剂和至少一种式2化合物或其盐之间的反应制备的中间体，
Figure S2006800269628D00151
以形成第二中间体；和
(b)进一步使反应混合物中的第二中间体反应，以制备所述的至少一种式1化合物。
在一项实施方案中，R1为氢，R2为叔丁基，R3为甲基，R4为甲基，且n为1。
在一项实施方案中，中间体为至少一种式3化合物或其盐，且第二中间体为至少一种式4化合物或其盐，
Figure S2006800269628D00152
在一项实施方案中，(b)中的进一步反应包含使第二中间体酰化。在一项实施方案中，在酰化之前，第二中间体可以作为盐被沉淀或分离出。
本文公开的另一项实施方案是制备至少一种式4化合物或其盐的方法，
Figure S2006800269628D00153
其中R＝-NR3R4，其中R3和R4各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C4)烷基，
该方法包括：使式3中间体或其盐还原，
Figure S2006800269628D00161
在一项实施方案中，式3中间体可以存在于反应混合物浆状液中。
在一项实施方案中，还原包括将至少一种还原剂与反应混合物合并。
本文公开的另一项实施方案是制备至少一种式1化合物或其可药用盐的方法，
Figure S2006800269628D00162
其中R1和R2各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C6)烷基以及环烷基，或者R1和R2与N一起形成杂环；R为-NR3R4，其中R3和R4各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C4)烷基；且n为1-4，
该方法包括：
(a)使至少一种硝化剂与至少一种式2化合物或其盐反应，以制备反应混合物，
Figure S2006800269628D00163
(b)在未从反应混合物中分离或沉淀任意固体的情况下，使至少一种还原剂与反应混合物合并，以制备中间体；和
(c)由中间体制备所述的至少一种式1化合物。
本文公开的另一项实施方案是制备至少一种式1化合物或其可药用盐的方法，
Figure S2006800269628D00171
其中R1和R2各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C6)烷基以及环烷基，或者R1和R2与N一起形成杂环；R为-NR3R4，其中R3和R4各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C4)烷基；且n为1-4，
该方法包括：
(a)在氢存在下，使至少一种含有第VIII族金属的催化剂与反应混合物、例如反应混合物浆状液合并，所述的反应混合物由至少一种硝化剂和至少一种式2化合物或其盐之间的反应制备，
Figure S2006800269628D00172
在一项实施方案中，所述的至少一种含有第VIII族金属的催化剂相对于在与所述至少一种硝化剂反应前所存在的所述至少一种式2化合物的量而言以0.1份至1份的量存在。
本文公开的另一项实施方案是包含至少一种式4化合物或其盐的组合物：
Figure S2006800269628D00173
其中R为-NR3R4，其中R3和R4各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C4)烷基，
其中式4的C4-差向异构体以如通过高效液相色谱法所测定的低于10％的量存在。
在一项实施方案中，R1为氢，R2为叔丁基，R3为甲基，R4为甲基，且n为1。
酰化
本公开内容的一项实施方案提供了制备至少一种式1化合物或其可药用盐的方法：
Figure S2006800269628D00181
其中R1和R2各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C6)烷基以及环烷基如(C3-C6)环烷基，或者R1和R2与N一起形成杂环，例如5元环；R为-NR3R4，其中R3和R4各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C4)烷基；且n为1-4，该方法包括在反应介质中使至少一种式4化合物或其盐，
Figure S2006800269628D00182
与至少一种氨基酰基化合物反应。在一项实施方案中，反应介质可选自水性介质以及在没有反应物碱存在时至少一种碱性溶剂。
在一项实施方案中，制备式1化合物的方法为制备替加环素或其可药用盐的方法：
Figure S2006800269628D00183
替加环素
在一项实施方案中，变量n为1，R1为氢，R2为叔丁基，且R3和R4各自为甲基。在另一项实施方案中，变量n为1，R1和R2与N一起形成吡咯烷基，且R3和R4各自为甲基。所述的至少一种式4化合物的盐可以为卤化盐，例如盐酸盐。
反应介质可以是选自极性非质子溶剂的溶剂或这些溶剂的混合物。在一项实施方案中，极性非质子溶剂选自乙腈、1，2-二甲氧基乙烷、二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺、六甲基磷酰胺、N，N’-二甲基亚乙基脲、N，N’-二甲基亚丙基脲、二氯甲烷、N-甲基吡咯烷酮、四氢呋喃及其混合物。在另一项实施方案中，极性非质子溶剂选自乙腈、二甲基甲酰胺、N，N’-二甲基亚丙基脲、N-甲基吡咯烷酮、四氢呋喃及其混合物。所述的至少一种碱性溶剂可以为乙腈与N，N’-二甲基亚丙基脲的混合物。在另一项实施方案中，所述的至少一种碱性溶剂可以为水与N，N’-二甲基亚丙基脲的混合物。在另一项实施方案中，所述的至少一种碱性溶剂为N，N’-二甲基亚丙基脲。
反应介质可以为水性介质。在另一项实施方案中，所述的在没有碱存在时的至少一种碱性溶剂为在没有碱存在时的水。在另一项实施方案中，反应介质可以为在没有反应物碱存在时的至少一种碱性溶剂。碱性溶剂为能够部分或完全接受质子的溶剂。反应物碱指在反应开始时加入、无论是与所述的至少一种式4化合物和所述的至少一种氨基酰基化合物同时还是或依次加入并且能够部分或完全接受质子的碱。反应物碱也指在反应期间加入的碱。
所述的至少一种氨基酰基化合物可选自氨基酰基卤化物、氨基酰基酐以及混合的氨基酰基酐。在一项实施方案中，氨基酰基化合物为至少一种式6的氨基酰基卤化物或其盐：
Figure S2006800269628D00191
其中R1和R2各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C6)烷基以及环烷基，或者R1和R2与N一起形成杂环；n为1-4；且其中Q为选自氟、溴、氯和碘的卤素。
在另一项实施方案中，Q为氯。式6化合物的盐可选自卤化盐。卤化盐指与卤素阴离子相互作用所形成的任意盐，例如盐酸盐、氢溴酸盐和氢碘酸盐。在一项实施方案中，卤化盐为盐酸盐。
所述的至少一种式6氨基酰基卤化物可通过包括如下步骤的方法来获得：
A)使至少一种式7的酯或其盐，
Figure S2006800269628D00201
与至少一种胺R1R2NH反应，以制备至少一种羧酸，
其中R1和R2各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C6)烷基以及环烷基，或者R1和R2与N一起形成杂环；X为选自溴、氯、氟和碘的卤素；A为-OR6，其中R6选自直链或支链(C1-C6)烷基和芳基烷基，例如芳基(C1-C6)烷基，例如其中芳基为苯基；n为1-4；和
B)使所述的至少一种羧酸与至少一种氯化剂反应，得到至少一种式6氨基酰基化合物或其盐。
在一项实施方案中，R1和R6可以各自为叔丁基。在另一项实施方案中，R1和R2与N一起可以形成杂环，例如吡咯烷，且R6可以为芳基烷基，例如苄基。在另一项实施方案中，n为1。在另一项实施方案中，x为溴。
在另一项实施方案中，所述的至少一种式7酯为盐酸盐。反应物中可以存在与式7酯相比而言过量的胺R1R2NH以制备至少一种羧酸。在一项实施方案中，所述的至少一种氯化剂可以为亚硫酰氯。在另一项实施方案中，所述的至少一种羧酸与至少一种氯化剂的反应包括添加催化量的二甲基甲酰胺。反应物中可以存在相对于所述的至少一种羧酸而言过量的氯化剂，以获得至少一种式6氨基酰基化合物。当R6为芳基烷基时，所述至少一种式7化合物的芳基烷基可以在与所述的至少一种胺反应后通过氢化裂解，以获得所述的至少一种羧酸。
所述至少一种羧酸与氯化剂的反应可以在55℃至85℃、例如80℃至85℃、还例如55℃的温度下进行。在一项实施方案中，可以向反应物中加入另外量的氯化剂以使反应完全，例如达到低于4％羧酸的水平。在使所述的至少一种羧酸与至少一种氯化剂反应后，可以过滤所得混悬液以除去盐，例如叔丁胺盐酸盐。式6的氨基酰基卤化物可以以盐酸盐的形式被分离或者用无机酸如盐酸进行处理，以制备氨基酰基卤化物盐。
在另一项实施方案中，至少一种式6的氨基酰基卤化物通过包括如下步骤的方法获得：
使至少一种式8羧酸或其盐
Figure S2006800269628D00211
其中R5选自直链或支链(C1-C6)烷基，且n为1至4，与至少一种氯化剂反应，获得至少一种式6的氨基酰基卤化物或其盐。
在另一项实施方案中，所述的至少一种式8羧酸为卤化盐，例如盐酸盐。至少一种式8化合物与至少一种氯化剂的反应时间可以为1至50小时、例如2至45小时、还例如1至3小时。所述的至少一种式8羧酸的粒度可以低于150微米、例如低于110微米、还例如为50至100微米。具有给定粒度的式8化合物可通过碾磨化合物来获得。
至少一种式4化合物与所述至少一种氨基酰基化合物的反应可以在0℃至30℃、例如20℃至25℃、例如10℃至17℃、例如0℃至6℃、还例如2℃至8℃的温度下进行。反应时间可以为1小时至24小时、例如0.5小时至4小时、还例如2小时至8小时。在反应中可以使用相对于式4化合物的量而言过量的氨基酰基化合物。在一项实施方案中，过量可以为3当量氨基酰基化合物对比于1当量的所述至少一种式4化合物。在另一项实施方案中，水性介质相对于所述至少一种式4化合物的比例可以为6∶1w/w或5∶1体积比。在一项实施方案中，氨基酰基化合物被加入所述至少一种式4化合物在水性介质中的溶液中或者与之合并。
在一项实施方案中，当反应介质为水性介质时，水性介质的pH可调节至pH为4至9、例如5至7.5、例如6.3至6.7、例如7.0至7.5、还例如6.5、还例如7.2。水可以在调节pH之前加入。调节pH可以包括添加碱，包括但不限于氢氧化铵。氢氧化铵的浓度可以为25％至30％。在另一项实施方案中，酸如盐酸可用于调节pH。在pH调节期间反应介质的温度可以为-5℃至25℃、例如5℃至8℃、还例如0℃至5℃。
在pH调节后，可以将至少一种有机溶剂或溶剂混合物加入水性介质中。在一项实施方案中，所述的至少一种有机溶剂混合物可以含有甲醇和二氯甲烷。甲醇的浓度可以为5％至30％，包括但不限于20％和30％。在另一项实施方案中，所述的至少一种有机溶剂或溶剂混合物包含四氢呋喃。混合物的温度可以为15℃至25℃。
在一项实施方案中，水性介质可以用至少一种极性质子溶剂和至少一种极性非质子溶剂的混合物来萃取。在一项实施方案中，所述的至少一种极性非质子溶剂包括二氯甲烷，且所述的至少一种极性质子溶剂包括甲醇。在另一项实施方案中，水性介质用至少一种极性非质子溶剂如二氯甲烷来萃取。萃取可以在-5℃至25℃、还例如在0℃至5℃的温度下进行。在另一项实施方案中，在各萃取之后，将水性介质的pH调节至7.0至7.5、例如7.2。萃取操作可以重复，例如重复最高达10次。
在一项实施方案中，所合并的有机萃取物可以用干燥剂如硫酸钠进行处理。有机萃取物还可以用活性碳如Norit CA-1进行处理。固体通过过滤除去以获得溶液。在一项实施方案中，溶液可以被浓缩以获得式1化合物。
由该反应获得的式1化合物可以在至少一种有机溶剂或溶剂混合物中结晶。在一项实施方案中，有机溶剂混合物包含甲醇和二氯甲烷。结晶可以例如在-15℃至155℃、例如0℃至15℃、还例如2℃至5℃的温度下发生。
在另一项实施方案中，在萃取之后，可以将所得的至少一种极性质子溶剂和至少一种极性非质子溶剂的有机混合物浓缩以获得浆状液，并过滤以获得所述的至少一种式1化合物。浓缩和过滤可以例如在0℃至5℃的温度下发生。
制备式1化合物的方法可采用高于5克、例如高于10克、例如高于50克、例如高于100克、例如高于500克、例如高于1公斤、还例如高于10公斤的式4胺来进行。
一项实施方案公开了通过本文所述的任一种方法制备的化合物，包括但不限于式1化合物、式4化合物、式6化合物、式7化合物、式8化合物及其盐。另一项实施方案包括包含通过本文所述的任一种方法制备的化合物的组合物。该组合物还可以包含可药用载体。
在一项实施方案中，组合物可包含至少一种式1化合物或其可药用盐：
Figure S2006800269628D00231
式1
其中n为1，R1和R2与N一起形成叔丁基，且R3和R4各自为甲基。在另一项实施方案中，组合物可以包含至少一种式1化合物或其可药用盐和低于0.5％的所述至少一种式1化合物或其可药用盐的C-4差向异构体：
Figure S2006800269628D00232
式1
其中R1和R2各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C6)烷基以及环烷基，或者R1和R2与N一起形成杂环；R为-NR3R4，其中R3和R4各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C4)烷基；且n为1-4。
在另一项实施方案中，组合物可包含替加环素或其可药用盐和低于0.5％的替加环素或其可药用盐的C-4差向异构体：
Figure S2006800269628D00233
替加环素
在一项实施方案中，通过本文公开的任一种方法所制备的式1化合物含有如通过高效液相色谱法测定的低于10.0％的杂质、例如低于5％的杂质、例如低于2％的杂质、还例如1-1.4％的杂质。在另一项实施方案中，式1化合物含有如通过高效液相色谱法测定的低于1.0％的量的C4-差向异构体，例如低于0.5％的C4-差向异构体，还例如低于0.2％的C4-差向异构体。在一项实施方案中，式1化合物含有如通过高效液相色谱法测定的低于1％的米诺环素、例如低于0.6％的米诺环素。在另一项实施方案中，式1化合物含有低于5％的二氯甲烷、例如低于2-3％的二氯甲烷。
本公开内容的一项实施方案包括制备至少一种式1化合物或其可药用盐的方法：
Figure S2006800269628D00241
式1
其中R1和R2各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C6)烷基以及环烷基，或者R1和R2与N一起形成杂环；R为-NR3R4，其中R3和R4各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C4)烷基；且n为1-4，
该方法包括：
A)使至少一种硝化剂与至少一种式2化合物或其盐反应，
Figure S2006800269628D00242
式2
以制备包含至少一种式3化合物或其盐的反应混合物浆状液，
Figure S2006800269628D00243
式3
B)使至少一种还原剂与反应混合物浆状液合并，以制备至少一种式4化合物或其盐，
Figure S2006800269628D00244
式4；和
C)使至少一种式4化合物与至少一种氨基酰基化合物在反应介质中反应，所述反应介质选自水性介质以及在没有反应物碱存在时至少一种碱性溶剂。
通过该方法制备的式1化合物可以是替加环素(tigecyline)。
本公开内容的另一项实施方案包括制备至少一种式1化合物或其可药用盐的方法：
Figure S2006800269628D00251
式1
其中R1和R2各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C6)烷基以及环烷基，或者R1和R2与N一起形成杂环；R为-NR3R4，其中R3和R4各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C4)烷基；且n为1-4，
该方法包括：
A)使至少一种还原剂与包含至少一种式3化合物或其盐的反应混合物浆状液合并，
Figure S2006800269628D00252
式3
以制备至少一种式4化合物或其盐，
Figure S2006800269628D00253
式4；和
B)使所述的至少一种式4化合物与至少一种氨基酰基化合物在反应介质中反应，所述反应介质选自水性介质以及在没有反应物碱存在时至少一种碱性溶剂。
在另一项实施方案中，通过上述方法制备的式1化合物可以为替加环素(tigecyline)。
纯化
本公开内容的一项实施方案提供了纯化至少一种式1化合物或其可药用盐的方法，
Figure S2006800269628D00261
式1
其中R1和R2各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C6)烷基以及环烷基，或者R1和R2与N一起形成杂环；R为-NR3R4，其中R3和R4各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C4)烷基；且n为1-4，
该方法包括：
A)使所述的至少一种式1化合物与至少一种极性非质子溶剂和至少一种极性质子溶剂合并，以获得第一混合物，
B)在0℃至40℃的温度下，使第一混合物混合至少一段时间，例如15分钟至2小时，和
C)获得所述的至少一种式1化合物。
如本文所用的术语“获得”指以有用的纯度水平、包括但不限于高于90％、95％、96％、97％、98％、99％的纯度水平分离化合物。纯度水平可通过高压液相色谱法来测定。
在一项实施方案中，纯化至少一种式1化合物的方法包括下述步骤：
A)使所述的至少一种式1化合物与至少一种极性非质子溶剂和至少一种极性质子溶剂合并，以获得第一混合物，
B)在30℃至40℃的温度下，使第一混合物混合一段时间段，
C)使第一混合物冷却至15℃至25℃，在未混合的情况下使混合物静置第二段时间段，
D)使第一混合物冷却至0℃至6℃，在未混合的情况下使混合物静置第三段时间段，和
E)获得所述的至少一种式1化合物。
在一项实施方案中，该方法可以包括至少一种式1化合物，其中n为1，R1为氢，R2为叔丁基，R3和R4各自为甲基。另一项实施方案包括至少一种式1化合物，其中n为1，R1和R2与N一起形成吡咯烷基，且R3和R4各自为甲基。与所述至少一种极性非质子溶剂和所述至少一种极性质子溶剂合并的所述至少一种式1化合物可以以选自固体、浆状液、混悬液和溶液的形式被提供。
在一项实施方案中，所述至少一种极性非质子溶剂可以选自丙酮、1，2-二氯乙烷、乙酸甲酯、甲乙酮、甲基异丁基酮、二氯甲烷和乙酸乙酯。在另一项实施方案中，所述至少一种极性非质子溶剂可以选自丙酮和二氯甲烷。在另一项实施方案中，所述至少一种极性质子溶剂可以选自甲醇、乙醇、异丙醇、叔丁醇。在另一项实施方案中，所述至少一种极性质子溶剂可以为甲醇。
所述至少一种极性非质子溶剂与至少一种极性质子溶剂的组合可包括丙酮和甲醇。另一项实施方案提供了所述至少一种极性非质子溶剂“二氯甲烷”与所述至少一种极性质子溶剂“甲醇”的组合。在另一项实施方案中，所述至少一种极性非质子溶剂与至少一种极性质子溶剂的组合可以包括乙酸甲酯和甲醇。式1化合物可以例如与等体积的所述至少一种极性非质子溶剂和所述至少一种极性质子溶剂合并。
在一项实施方案中，第一混合物可以例如混合30分钟至2小时的第一段时间段，此时温度为15℃至25℃，随后混合30分钟至2小时的第二段时间段，此时温度为0℃至2℃。在一项实施方案中，第一段时间段和第二段时间段各自为1小时。在另一项实施方案中，该方法可以包括在15℃至25℃的温度下使第一混合物混合至少一段30分钟至2小时的时间段，随后过滤第一混合物以获得固体。该方法还可以包括在15℃至25℃的温度下使固体与至少一种极性非质子溶剂和至少一种极性质子溶剂合并、例如以等体积合并30分钟至2小时的第一段时间段并过滤以获得第二固体。在另一项实施方案中，这些合并和过滤步骤可重复二至十五次。
纯化式1化合物的方法还可以包括：由第一混合物获得固体，使固体与至少一种极性质子溶剂和至少一种极性非质子溶剂合并以获得第二混合物。第二混合物可以例如包含甲醇和二氯甲烷，其中甲醇：二氯甲烷体积比为1∶5至1∶15。在一项实施方案中，第二混合物可以在30℃至36℃的温度下混合，然后过滤以获得溶液。在另一项实施方案中，极性质子溶剂在溶液中的浓度可以被降低至低于5％的水平，溶液在过滤前可以混合、例如在0℃至6℃的温度下混合一段时间段、例如30分钟至2小时的时间段。
在一项实施方案中，混合第一混合物可以在10至20分钟、例如15分钟的时间段期间发生。在一项实施方案中，使第一混合物冷却至15℃至25℃并使混合物在未混合的情况下静置可以在30分钟至3小时、例如1小时至2小时的第二段时间段期间发生。第一混合物可进一步冷却至0℃至6℃，并使其在未混合的情况下静置30分钟至2小时、例如1小时的第三段时间段。
获得式1化合物可以包括通过至少一种选自减热原过滤器和澄清过滤器的滤器来过滤本文所述的任意混合物。
如本文所公开的那样，混合可以通过采用机械混合装置如搅拌器或搅动器来进行。混合还可通过式1化合物在溶剂系统中的溶解来进行。升高温度可以增加溶解度。
在一项实施方案中，当至少一种式1化合物用于与至少一种极性非质子溶剂和至少一种极性质子溶剂合并时，所述的至少一种式1化合物可以以其可药用盐的形式来使用。当至少一种式1化合物作为本发明方法的产物被获得时，所述的至少一种式1化合物可以以其可药用盐的形式回收。
在另一项实施方案中，当式1化合物通过本发明的方法获得时，该化合物可以通过加入酸而转化为其可药用盐。
在一项实施方案中，所述的至少一种式1化合物可以为[4S-(4α，12aα)]-4，7-双(二甲基氨基)-9-[[(叔丁基氨基)乙酰基]氨基]-1，4，4a，5，5a，6，11，12a-八氢-3，10，12，12a-四羟基-1，11-二氧代-2-并四苯-甲酰胺，例如可药用盐，例如HCl盐。在另一项实施方案中，所述的至少一种式1化合物可以为[4S-(4α，12aα)]-4，7-双(二甲基氨基)-9-[[(吡咯烷基)乙酰基]氨基]-1，4，4a，5，5a，6，11，12a-八氢-3，10，12，12a-四羟基-1，11-二氧代-2-并四苯-甲酰胺，例如可药用盐，例如HCl盐。
纯化至少一种式1化合物的方法可以是纯化替加环素的方法，该方法包括：
A)使替加环素与至少一种极性非质子溶剂和至少一种极性质子溶剂合并，以获得第一混合物，
B)使第一混合物在0℃至40℃的温度下混合至少一段时间段，例如15分钟至2小时的时间段，和
C)获得替加环素。
与至少一种极性非质子溶剂和至少一种极性质子溶剂合并的替加环素可以以选自固体、浆状液、混悬液和溶液的形式被提供。在一项实施方案中，由该方法获得的替加环素可以含有如通过高压液相色谱法(HPLC)测定的低于1％的替加环素或其可药用盐的C-4差向异构体。
由该方法获得的所述至少一种式1化合物可以含有如通过HPLC测定的低于3.0％的杂质、例如低于1.0％的杂质、例如低于0.7％的杂质。在另一项实施方案中，所述的至少一种式1化合物可以含有如通过RPLC测定的低于2％的式1化合物或其可药用盐的C-4差向异构体、例如低于1％的C-4差向异构体、例如低于0.5％的C-4差向异构体。
该方法可以在高于5克的所述至少一种式1化合物的水平上进行，例如高于50克、例如高于100克、例如高于500克、例如高于1公斤、还例如高于10公斤。
一项实施方案公开了通过本文所述的任一种方法制备的化合物，包括但不限于式1化合物和替加环素。另一项实施方案包括包含通过本文所述的任一种方法制备的化合物的组合物。该组合物可进一步包含可药用载体。
在一项实施方案中，该组合物可包含至少一种式1化合物或其可药用盐：
Figure S2006800269628D00291
式1
其中n为1，R1为氢，R2为叔丁基，且R3和R4各自为甲基。
本公开内容的一项实施方案包括制备至少一种式1化合物或其可药用盐的方法：
Figure S2006800269628D00301
式1
其中R1和R2各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C6)烷基以及环烷基，或者R1和R2与N一起形成杂环；R为-NR3R4，其中R3和R4各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C4)烷基；且n为1-4，
该方法包括：
A)使至少一种硝化剂与至少一种式2化合物或其盐反应，
Figure S2006800269628D00302
式2
以制备反应混合物、例如反应混合物浆状液，其包含中间体、例如至少一种式3化合物或其盐，
Figure S2006800269628D00303
式3
B)使至少一种还原剂与反应混合物浆状液合并，以制备第二中间体，例如至少一种式4化合物或其盐，
式4
C)使第二中间体与至少一种氨基酰基化合物在反应介质中反应，以获得至少一种式1化合物。在一项实施方案中，反应介质选自水性介质以及在没有反应物碱存在时至少一种碱性溶剂。另外的步骤可以包括例如下述步骤中的至少一个步骤：
D)使所述至少一种式1化合物与至少一种极性非质子溶剂和至少一种极性质子溶剂合并，以获得第一混合物，
E)在例如0℃至40℃的温度下，使第一混合物混合至少一段时间段、例如15分钟至2小时的时间段，和
F)获得至少一种式1化合物。在一项实施方案中，所公开方法的任意中间体可以被分离或沉淀出。在另一项实施方案中，所公开方法中的任意方法的两个或多个步骤为“单罐”操作。
本公开内容的另一项实施方案包括制备至少一种式1化合物或其可药用盐的方法：
Figure S2006800269628D00311
式1
其中R1和R2各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C6)烷基以及环烷基，或者R1和R2与N一起形成杂环；R为-NR3R4，其中R3和R4各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C4)烷基；且n为1-4，
该方法包括：
A)使至少一种还原剂与包含至少一种式3化合物或其盐的反应混合物、例如反应混合物浆状液合并，
Figure S2006800269628D00312
式3
以制备至少一种中间体，例如式4化合物或其盐，
式4
B)使中间体与至少一种氨基酰基化合物在选自水性介质的反应介质中反应，以获得式1化合物。在一项实施方案中，反应介质可以选自在没有反应物碱存在时的至少一种碱性溶剂。另外的步骤可以包括例如下述步骤中的至少一个步骤：
C)使所述的至少一种式1化合物与至少一种极性非质子溶剂和至少一种极性质子溶剂合并，以获得第一混合物，
D)在例如0℃至40℃的温度下，使第一混合物混合至少一段时间段、例如15分钟至2小时的时间段，和
E)获得至少一种式1化合物。
本公开内容的另一项实施方案包括制备至少一种式1化合物或其可药用盐的方法：
Figure S2006800269628D00322
式1
其中R1和R2各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C6)烷基以及环烷基，或者R1和R2与N一起形成杂环；R为-NR3R4，其中R3和R4各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C4)烷基；且n为1-4，
该方法包括：
A)使至少一种式4化合物或其盐与至少一种氨基酰基化合物在反应介质中反应，所述反应介质例如选自水性介质以及在没有反应物碱存在时至少一种碱性溶剂，
Figure S2006800269628D00331
式4
以获得式1化合物。另外的步骤可以包括下述步骤中的至少一个步骤：
B)使所述的至少一种式1化合物与至少一种极性非质子溶剂和至少一种极性质子溶剂合并，以获得第一混合物，
C)在例如0℃至40℃的温度下，使第一混合物混合至少一段时间段、例如15分钟至2小时的时间段，和
D)获得至少一种式1化合物。
所公开的制备式1化合物的这些方法中的任一种可以是制备如下定义的式1化合物的方法，其中n为1，R1为氢，R2为叔丁基，且R3和R4各自为甲基。
药物组合物
如本文所用的“药物组合物”指医药组合物。药物组合物可含有至少一种可药用载体。
如本文所用的“可药用赋形剂”指适于施用本文所提供的化合物的药用载体或赋形剂，包括本领域技术人员已知适于特定施用模式的任意这类载体。例如，用于胃肠道外、真皮内、皮下或局部应用的溶液或混悬液可包括无菌稀释液(例如注射用水、盐水溶液、不挥发油等)；天然存在的植物油(例如芝麻油、椰子油、花生油、棉籽油等)；合成脂肪载体(例如油酸乙酯、聚乙二醇、甘油、丙二醇等，包括其它合成溶剂)；抗微生物剂(苯甲醇、尼泊金甲酯等)；抗氧化剂(例如抗坏血酸、亚硫酸氢钠等)；螯合剂(例如乙二胺四乙酸(EDTA)等)；缓冲剂(例如乙酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐等)；和/或用于调节张力的物质(例如氯化钠、右旋糖等)；或其混合物。进一步举例而言，当静脉内施用时，适宜的载体包括生理盐水、磷酸盐缓冲盐水(PBS)以及含有增稠和增溶物质如葡萄糖、聚乙二醇、聚丙二醇等及其混合物的溶液。
作为非限制性的实例，替加环素可任选与一种或多种可药用赋形剂合并，并且可以以诸如片剂、胶囊剂、可分散粉末、颗粒或含有例如约0.05至5％助悬剂的混悬剂或者含有例如约10至50％糖的糖浆剂和含有例如约20至50％乙醇的酏剂等的形式经口服施用，或者以无菌可注射溶液或含有在等张介质中的约0.05至5％助悬剂的混悬液的形式经胃肠道外施用。这些药物制剂可含有与载体组合的例如约25至约90％重量的活性成分、更通常是约5％至60％重量。其它制剂在美国专利5,494,903和5,529,990中有讨论，其引入本文作为参考。
术语“可药用盐”指本公开内容中的化合物的酸加成盐或碱加成盐。可药用盐是保留母体化合物的活性并且对施用其的受治疗者以及在施用其的背景中不产生任何有害或不希望的作用的盐。可药用盐包括金属复合物以及无机酸和有机酸的盐。可药用盐包括金属盐如铝盐、钙盐、铁盐、镁盐、锰盐和复合物盐。可药用盐包括酸的盐，例如乙酸盐、天门冬氨酸盐、烷基磺酸盐、芳基磺酸盐、axetil(醋氧乙)、苯磺酸盐、苯甲酸盐、碳酸氢盐、硫酸氢盐、酒石酸氢盐、丁酸盐、钙依地酸盐、camsylic(樟脑磺酸)、碳酸盐、氯苯甲酸盐、cilexetil(西赛替尔)、柠檬酸盐、依地酸盐、乙二磺酸盐(edisylic)、十二烷基磺酸盐(estolic acid)、esyl(乙磺酰基)、esylic(乙磺酸)、甲酸盐、富马酸盐、gluceptic(葡庚酸盐)、葡糖酸盐、谷氨酸盐、乙醇酸盐、羟乙酰基氨苯胂酸盐、环己磺酸盐、己基间苯二甲酸盐(hexylresorcinoic acid)、hydrabamic(海卓巴米克酸盐)、氢溴酸盐、盐酸盐、氢碘酸盐、羟萘甲酸盐、羟乙磺酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、马来酸盐、苹果酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基硝酸盐、甲基硫酸盐、粘酸盐、粘康酸盐、napsylic acid(萘磺酸盐)、硝酸盐、草酸盐、对硝基甲磺酸盐、扑酸盐、泛酸盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、酞酸盐、聚半乳糖醛酸、丙酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、氨基磺酸盐、对氨基苯磺酸盐、磺酸盐、硫酸盐、鞣酸盐、酒石酸盐、teoclic acid(提欧里克酸盐)、甲苯磺酸盐等。可药用盐可衍生自氨基酸，包括但不限于半胱氨酸。其它可接受的盐可以例如在Stahl等人，Pharmaceutical Salts：Properties，Selection，and Use，Wiley-VCH；第1版(2002年6月15日)中找到。
除了在实施例中以及另有指示时，说明书和权利要求书中所用的所有数值应被理解为在所有实例中以术语“约”进行修饰。因此，除非有相反指示，本说明书和所附的权利要求中所给出的数值参数是近似值，其可以根据通过本公开内容所寻求获得的所需性质而改变。最起码地，并且不是意欲限制等同原则对权利要求范围的应用，每个数值参数应当考虑有效数字的数和常规四舍五入方法来解释。
虽然设定公开内容的宽范围的数值范围和参数是近似值，但是在具体实施例中所给出的数值被尽可能精确地报道。然而，任意数值本质上包含某些由在它们各自的测试测定中发现的标准偏差所必然产生的误差。
下述实施例意欲以非限制性的方式解释说明本发明。
实施例
硝化
米诺环素根据美国专利3,226,436所述的方法制得。
HPLC分析在下述条件下进行：
柱： Inertsil ODS3 5μm，25×0.46cm
流动相： 80％A+20％B，其中A＝90％(0.05M KH2PO4+5mL三乙胺/L(磷酸盐+H3PO4至pH 6)/10％乙腈，用H3PO4调节至pH 3.0B＝乙腈
流速 1.0mL/min
检测 250nm
比较例1：9-硝基米诺环素的制备
该比较例描述了米诺环素的硝化，其中硝化产物被分离出。
在搅拌下将13.44g对氯苯磺酸米诺环素(即对氯苯磺酸[4S-(4α，12aα)]-4，7-双(二甲基氨基)-1，4，4a，5，5a，6，11，12a-八氢-3，10，12，12a-四羟基-1，11-二氧代-2-并四苯甲酰胺)缓慢加入50mL浓硫酸中。将溶液冷却至0-15℃。缓慢加入硝酸(90％，0.6mL)，于0-15℃搅拌溶液1至2小时直至通过HPLC测定反应完全。在搅拌下，历经20分钟将含有中间体9-硝基米诺环素硫酸盐(即[4S-(4α，12aα)-9-硝基]-4，7-双(二甲基氨基)-1，4，4a，5，5a，6，11，12a-八氢-3，10，12，12a-四羟基-1，11-二氧代-2-并四苯甲酰胺硫酸盐)的溶液转移至300g冰水混合物中。采用28％氢氧化铵水溶液调节淬灭物的pH至5.0-5.5，同时维持温度在0-8℃之间。过滤沉淀物，用水洗涤(2×10mL)。在氮气流下真空干燥固体，获得9g粗的9-硝基米诺环素硫酸盐。
HPLC分析(面积％)显示纯度为90％，C4-差向异构体含量为1.5％。MS(FAB)：m/z 503(M+H)，502(M+)。产物通过在其等电点从水溶液中沉淀而分离出。硫酸盐粗品的摩尔产率为45％。
下表1列出了其它硝化操作的数据：
表1
硝基米诺环素     杂质 米诺环素(μg/mg) 摩尔产率(％)
    A     43.15     3.62     38
    B     27.88     5.5     34
可以看出，9-硝基米诺环素的分离导致高含量的杂质。
比较例2：9-硝基米诺环素的制备
该比较例描述了米诺环素的硝化，其中硝化产物被分离出。
将2升多颈玻璃烧瓶装配机械搅拌器、热电偶、液体添加管、氮气管线和连接至30％(wt.)碱洗涤器的气体出口。向烧瓶中装入硫酸66°Be(1,507g，819mL，15moles)。将溶液冷却至0至2℃。在搅拌下，于0至14℃历经0.7小时将米诺环素.HCl(效价92.7％，311g，0.58moles)加入硫酸中。在添加后，混合物于0℃搅拌0.5小时，获得黄色溶液。历经3小时加入硝酸(95.9％硝酸根含量，48g，32mL，0.73moles，1.25摩尔当量)，同时保持混合物在0至2℃。将混合物于0℃搅拌0.3小时(暗红色/黑色溶液)。HPLC分析(面积％)显示：0％米诺环素，75.6％9-硝基米诺环素，8.2％最大单项杂质(LSI)；对米诺环素而言的相对保留时间(RRT)＝2.08。
将22升多颈玻璃烧瓶装配机械搅拌器、热电偶和具有氮气保护的冷凝器。向烧瓶中装入6,704g(8,540mL)异丙醇(IPA)和1,026g(1,500mL)庚烷。然后将溶液冷却至0-5℃。在0-39℃下，历经2小时将9-硝基米诺环素反应混合物转移至22升烧瓶中，以产生黄色浆状液。浆状液温度在34-39℃维持2小时，然后冷却至20-34℃并在20-34℃下搅拌14.6小时。
制备异丙醇3,028g(3,857mL)和庚烷660g(965mL)的溶液并维持在20-25℃(IPA∶庚烷的体积比为4∶1)。将浆状液采用1号Whatman滤纸在真空和氮气保护下经直径30cm的布氏漏斗过滤。将所得的湿滤饼转移至装配有机械搅拌器和氮气保护的4升玻璃锥形瓶中。在23-26℃下通过历经0.5小时加入1,608mL所制备的IPA/庚烷溶液使滤饼形成浆状液。
将浆状液再次如上所述过滤。湿滤饼如上所述重新制成浆状液二次(总共重新制成浆状液三次)。最后一次过滤后，将滤饼在氮气保护下在真空中维持0.2小时。产物在40℃和在23至11mmHg的真空下干燥48小时，至干燥失重(LOD，80℃，1小时，＞49mmHg真空)值为1.54。所得9-硝基米诺环素硫酸盐的重量为380.10g，HPLC强度＝76.3％(作为硫酸氢盐)，总杂质＝34.6％，最大单项杂质(LSI)9.46％(RRT＝0.94)。自米诺环素.HCl的产率＝86％。对产物和原料强度矫正的产率＝71％。
可以看出，9-硝基米诺环素化合物的分离导致具有高百分比杂质的产物。
实施例1
下表2概括了采用比较例2所概述的操作进行的硝化实验，其中修改下述变量：硝酸添加时间；反应温度；硝酸(相对于米诺环素HCl)的摩尔当量；和搅拌速率。根据本文公开的方法，这些反应物中没有一者被淬灭或进行后处理以分离产物。所用的唯一分析工具是HPLC分析。
表2
HNO3添加时间(小时) 反应温度(℃)1 摩尔当量HNO3 米诺环素(面积％) 9-硝基米诺环素(面积％) 总杂质(面积％) RRT0.44(面积％) RRT0.51(面积％) RRT0.57(面积％) RRT 1.23(面积％)
    2     0   1.09     7.6     69.7     22.7     0.8     3.8     5.7     9.8
    2.25     0   1.2     5.2     70.3     24.5     0.4     4.3     6.9     10.8
    2.5     0   1.3     2.4     68.2     29.4     0.0     5.4     8.9     12.9
    2.75     0   1.43     0.0     65.6     34.4     0.0     6.7     11.2     14.0
    2     0   1.36     4.0     55.0     41.0     0.3     6.5     11.1     17.0
    2.25     0   1.5     0.7     50.6     48.7     0.0     7.2     11.3     19.0
    2.2     20   1.36     7.5     54.3     38.2     2.8     8.6     15.3     5.1
    2.45     20   1.5     4.0     52.0     44.0     2.9     10.0     17.7     5.6
    2.7     20   1.56     2.7     52.0     45.3     3.3     11.0     19.4     6.2
    0.25     0   1.36     1.6     56.7     41.7     6.3     0.0     13.9     18.4
    0.5     0   1.62     0.8     43.8     55.4     5.3     0.0     24.6     23.2
    0.8     0   1.3     2.1     63.4     34.5     3.5     0.0     9.4     18.2
    1     0   1.62     0.7     43.5     55.8     5.8     0.0     21.5     23.5
    2.4     0   1.3     2.2     60.6     37.2     5.7     0.0     12.8     15.3
    3     0   1.62     0.4     43.3     56.3     9.3     0.0     23.7     19.7
    1.6     0   1.3     4.6     60.9     34.5     3.1     0     9.5     21
    2     0   1.62     0     48.5     51.5     5.1     0     16.1     26.8
    2.8     5   1.38     1.8     71.9     26.3     3.8     0     8     12.5
    3.1     5   1.58     0     60     40     6.1     0     15.6     15.4
    2.4     5   1.07     3.6     74.8     21.6     1.9     0     4.1     11.1
    3     5   1.33     0     70     30     4.2     9.3     0     14.9
1由于容器尺寸，在这些反应中仅监测浴温。
2反应在原始米诺环素浓度的50wt％。
3相对于所有其它实验而言，搅拌是剧烈的。
4HNO3以在H2SO4中的50wt％添加。
可以看出，尽管所采用的条件不同，起始米诺环素的量以低于10％的量存在，并且在某些条件下基本上被除去。
实施例2
实验还进行修改的硝化反应、反应物淬灭和硝化反应物的后处理。采用比较例2中所概述的操作进行实验，其中修改下述变量：硝酸添加时间；反应温度；硝酸(相对于米诺环素HCl)的摩尔当量；淬灭温度；淬灭溶液的组成；将反应混合物加入淬灭溶液的时间；和所分离滤饼的洗涤方法。数据显示于下表3。所用的唯一分析工具是HPLC分析。
表3
    HNO3添加时间(小时) 反应温度(℃)1 摩尔当量HNO3 强度(二H2SO4盐，％) 总杂质(％) LSI(％) 淬灭溶液的组成2 淬灭温度(℃)     淬灭加入时间(小时) 洗涤方法3 产率(校正，％)4
    4.6     5   1.67   62.7   40.1   21.6   IPA/庚烷     0     0.1     1     60
    4.6     5   1.67   61.0   39.7   18.8   IPA/庚烷     34     0.1     1     55
    5.1     5   1.75   55.8   36.2   18.3   IPA     0     0.2     1     56
    5.1     5   1.75   56.0   38.9   18.2   IPA     34     0.2     1     52
    3     5   1.63   75.4   29.5   19.1   IPA/庚烷     0     1     1     70
    3     5   1.63   74.8   27.8   18.9   IPA/庚烷     34     1     1     79
    3     5   1.51   83.6   22.2   13.0   IPA     0     1     1     64
    3     5   1.51   84.8   22.4   12.9   IPA     34     1     1     102
    3.5     -5   1.38   84.3   7.7   7.2   IPA/庚烷     05     2     1     96
    3.5     -5   1.38   101.8   11.4   8.3   IPA/庚烷     05     2     2     104
1由于容器尺寸，在这些反应中仅监测浴温。
2当IPA用作淬灭物时，随后添加庚烷以获得原始淬灭混合物的组合物。
3洗涤方法1：将湿滤饼在滤器上用4∶1的IPA∶庚烷(体积比)洗涤。洗涤方法2：将湿滤饼用4∶1的IPA∶庚烷(体积比)形成浆状液三次。洗涤方法#2比洗涤方法#1多使用20％的洗涤溶液。
4产率对产物和原料的强度进行了校正。
5淬灭在0℃开始，随后立即加热至34℃并在淬灭的剩余时间保持在34℃。
由表3的数据可以看出，产率至少为50％。
实施例3
该实施例显示了改变硝化步骤所需的硝酸量(以当量计)的结果。硝酸经滴定为89.5％，相应地校正用量。
进行三项试验。试验1使用1.25当量的硝酸，试验2使用1.09当量硝酸，且试验3使用1.00当量的硝酸。
试验1的HPLC完全测试显示没有米诺环素的信号，而试验2的完全测试显示有2.5％未反应的原料。采用SLP操作，将两种反应物均进行氢化、然后转化为氨基米诺环素盐酸盐。
氢化产物1(来自试验1)显示米诺环素含量为0.37％；强度＝83.0％，总杂质＝3.20％；单项杂质＝0.52％；差向异构体含量＝1.1％。
氢化产物2(来自试验2)显示米诺环素含量为1.6％；强度＝84.2％；总杂质＝4.00％；单项杂质＝0.35％；差向异构体含量＝1.0％。
试验3：强度＝83.0％；总杂质＝5.0％；单项杂质＝2.7％；差向异构体含量＝1.1％。
还原
HPLC分析在下述条件下进行：
柱： Inertsil ODS3 5μm，25×0.46cm
流动相： 80％A+20％B，其中A＝90％(0.05M KH2PO4+5mL三乙胺/升磷酸盐+H3PO4至pH 6)/10％乙腈，用H3PO4调节至pH 6.0B＝乙腈
流速 1.0mL/min
检测 250nm
实施例1
该实施例描述了氢化反应，其中未分离9-硝基米诺环素中间体。
在搅拌下，将10.1g对氯苯磺酸米诺环素缓慢加入27mL浓硫酸中。将溶液冷却至0-2℃。缓慢加入硝酸(0.6mL，90％)，将溶液在0-2℃下搅拌1至2小时直至通过HPLC测定反应完全。在硝化完全后，在搅拌下将含有中间体9-硝基米诺环素硫酸盐的溶液转移至150mL异丙醇和1200mL甲醇中，同时保持温度低于10-15℃。将溶液在26-28℃和40psi下、在10％披钯炭催化剂(50％湿)的存在下氢化3小时。氢化完成后，滤除催化剂，于0-5℃将溶液在搅拌下缓慢倒入250mL异丙醇。滤出固体(3.4g)。HPLC(面积％)测得粗品纯度为90％。C4-差向异构体存在的量为0.9％。MS(FAB)：m/z 473(M+H)，472(M+)。
实施例2
该实施例描述了氢化反应，其中未分离9-硝基米诺环素中间体。
在搅拌下，将84.3g对氯苯磺酸米诺环素缓慢加入368g浓硫酸中。将溶液冷却至10-15℃。缓慢加入硝酸(0.6mL，发烟)。将溶液于10-15℃搅拌1至2小时直至通过HPLC测定反应完全。在硝化完全后，将含有中间体9-硝基米诺环素硫酸盐的溶液在搅拌下转移至0.3kg甲醇中，同时保持温度低于10-15℃。将溶液在26-28℃和50psi下、在10％披钯炭催化剂(50％湿)的存在下氢化2-3小时。氢化完成后，滤除催化剂，在搅拌下于0-5℃将溶液缓慢倒入0.6kg异丙醇和0.3kg正庚烷中。滤出固体。
将湿固体溶于0-5℃的100g水中。搅拌混合物，分离并弃去有机相。向水相中加入14.4g浓HCl。采用氢氧化铵将溶液的pH调节至4.0±0.2。加入100mg亚硫酸钠，溶液用100mg 9-氨基米诺环素进行接种。将混合物在0-5℃下搅拌4小时，过滤产物并干燥，获得28.5g固体。HPLC(面积％)测定纯度为96.5％，含有0.9％C4-差向异构体。MS(FAB)：m/z 473(M+H)，472(M+)。产率：54.2％。
比较例1
该比较例描述了氢化反应，其中9-硝基米诺环素中间体被分离。
将52.0kg米诺环素.HCl(效价92.4％)倒入在300加仑容器中的0至15℃的4.8份(251kg)硫酸66°Be中，搅拌以除去HCl。历经3小时20分钟加入7.48kg硝酸(发烟100％，95.9％硝酸根含量，1.26当量)。
HPLC分析显示残余＞1％的米诺环素。因此，加入0.31kg硝酸(发烟100％，95.5％硝酸根含量，0.05当量)。HPLC分析仍显示残余＞1％的米诺环素。另外加入0.74kg硝酸(发烟100％，95.5％硝酸根含量，0.12当量)。由于HPLC测试再次显示残余＞1％的米诺环素，因此另外加入1.11kg硝酸(发烟100％，95.5％硝酸根含量，0.19当量)，之后显示残余＜1％的米诺环素。
在0至36℃下，将硝化反应混合物转移至21.5份IPA/3.3份庚烷(1120kg IPA/171kg庚烷)的溶液中。过滤浆状液(过滤时间冗长)，用IPA/庚烷4∶1洗涤、在NMT上于40℃干燥至NMT的LOD为6％，生成70.9kg硫酸盐(97％粗产率)，供还原反应使用。
实施例3
该实施例描述了氢化反应，其中未分离9-硝基米诺环素中间体。
将25.0kg米诺环素.HCl(效价94.4％)倒入在100加仑容器中的5至15℃的7.3份(183kg)硫酸66°Be中，搅拌以除去HCl。于9至15℃历经78分钟向容器内加入2.5015kg硝酸(85％，86.6％硝酸根含量，1.25当量)。
HPLC分析显示残余＞1％的米诺环素。另外加入0.261kg硝酸(85％，86.6％硝酸根含量，0.13当量)。HPLC再次显示残余＞1％的米诺环素，另外加入0.261kg硝酸(85％，86.6％硝酸根含量，0.13当量)。由于HPLC仍显示残余＞1％的米诺环素，加入另外的0.174kg硝酸(85％，86.6％硝酸根含量，0.09当量)，之后显示反应在1.7％米诺环素原料处到达平台。
在-20至10℃下，将硝化反应混合物转移至4.2份(106kg)甲醇中。将淬灭的批料调节至4至10℃，原样用于还原反应。
比较例2
该比较例描述了氢化反应，其中9-硝基米诺环素中间体被分离。
将104kg米诺环素.HCl(效价90.3％)倒入在300加仑容器中的0至10℃的4.8份(502kg)硫酸66°Be中，搅拌以除去HCl。于0至6℃和100rpm历经3小时加入15.2kg发烟硝酸(100.4％，1.25当量)。由于HPLC测试显示残余＞1％的米诺环素，加入另外的0.69kg发烟硝酸(100.4％，0.06当量)，之后米诺环素＜1％。在0至36℃下，将硝化反应混合物转移至21.5份IPA/3.3份庚烷的溶液中。
过滤浆状液(过滤时间冗长)，用IPA/庚烷4∶1洗涤、在NMT上于40℃干燥至NMT的LOD为6％，生成140kg硫酸盐(95％粗产率)，供还原反应使用。
实施例4
该实施例描述了氢化反应，其中未分离9-硝基米诺环素中间体。
将104kg米诺环素.HCl(效价90％)倒入5至15℃的7.3份(763kg)硫酸66°Be中，搅拌以除去HCl。于5至15℃和120rpm历经1小时加入14.9kg发烟硝酸(100.4％，1.25当量)。由于HPLC测试显示残余＞1％的米诺环素，加入另外的0.69kg发烟硝酸(100.4％，0.06当量)，之后显示米诺环素＜1％。
在-10至-20℃下，将硝化反应混合物转移至4.2份(440kg)甲醇中。将淬灭的批料调节至4至10℃，原样用于还原反应。
比较例3
该比较例描述了氢化反应，其中9-硝基米诺环素中间体被分离。溶剂/反应试剂的比例是相对于硝化反应之前的米诺环素初始加入量而言的。
历经1小时将比较例4的9-硝基米诺环素硫酸盐反应混合物淬灭入2240kg(21.5份)异丙醇和342kg(3.3份)庚烷中，同时维持批料温度在0至36℃。将所得浆状液在30至36℃下搅拌2小时，然后冷却，并在19至25℃下搅拌1小时。过滤一半浆状液，用3×205kg IPA/庚烷(4∶1)v/v洗涤，在NMT上于40℃干燥至NMT的LOD为6％。过滤和干燥花费16天(其中7天在预定的工厂停工期间湿滤饼在氮气下闲置)，生成58kg硫酸盐。将另一半浆状液滚筒转动(drummed)并冷冻以待进行过滤。冷冻12天，然后倒回容器中，于0至6℃搅拌2天，然后调节至19至25℃，过滤，用3×205kg IPA/庚烷(4∶1)v/v洗涤，在NMT上于40℃干燥至NMT的LOD为6％。过滤和干燥花费6天，生成82kg硫酸盐。
于19至25℃将亚-批料(lot)的9-硝基米诺环素硫酸盐溶于672kg(6.5份)甲醇和8.4kg(0.08份)注射用水(USP)中，采用70psig氢气和2.74kg(0.026份)披钯炭(湿10％(w/w))还原为9-氨基米诺环素硫酸盐。氢化反应花费10.5小时，导致没有可检测的原料。
过滤9-氨基米诺环素硫酸盐反应混合物以除去催化剂，历经1小时淬灭入0至27℃的1660kg(16份)IPA/710(6.8份)庚烷的溶液中。将所得混合物调节至19至25℃并搅拌1小时。
将9-氨基米诺环素硫酸盐浆状液在Nutsche滤器上过滤，用2×162kg(每次1.5份)IPA/庚烷(4∶1)v/v洗涤，在40℃下干燥至LOD低于4％。过滤、洗涤和干燥花费10天，得到94.0kg 9-氨基米诺环素硫酸盐。过滤后，在母液中观察到固体。过滤这些固体，用113kg IPA/庚烷(4∶1)v/v洗涤，在40℃下干燥至LOD低于4％。回收24.1kg。保留作为分离的批料(lot)。由米诺环素得到9-氨基米诺环素硫酸盐的总粗产率为84％。
将94.0kg“第一批收获物”干燥的9-氨基米诺环素硫酸盐和0.084kg(0.0008份)亚硫酸钠溶于538kg(5.17份)注射用水(USP)中，冷却至0至6℃。需要0kg盐酸20°Be以使9-氨基米诺环素硫酸盐的pH为1.1±0.1，因为初始pH为1.16。将48.3kg(0.46份)盐酸反应试剂加入9-氨基米诺环素溶液中，形成9-氨基米诺环素HCl。将56kg(0.54份)氢氧化铵、28％和4.0kg(0.039份)盐酸反应试剂加入溶液中，获得批料pH为4.0±0.2。
然后将批料在0至6℃下搅拌90分钟，同时确保pH维持在4.0±0.2。最终pH读数为4.05pH单位。将批料在Nutsche滤器上过滤，用2×33kg(每次0.3份)预冷至2-8℃的注射用水(pH调至4.0)洗涤，然后通过2×26.1kg(0.25份)丙酮(预冷至2-8℃)洗涤，在NMT上于40℃干燥至NMT的水份含量为7.0％。分离43.2kg 9-氨基米诺环素HCl，由米诺环素HCl开始的产率为40％。
类似于前四个段落所述的方法，采用成比例量的反应试剂，进行24.1kg“第二批收获物”干燥的9-氨基米诺环素硫酸盐通过盐变化的加工。回收另外的9.9kg 9-氨基米诺环素HCl，代表9.2％的额外增加产率。包括两批收获物的总批料产率为53.1％。
实施例5
该实施例描述了氢化反应，其中未分离9-硝基米诺环素中间体。溶剂/反应试剂的比例是相对于硝化反应之前的米诺环素初始加入量而言的。
历经90分钟将来自实施例7的9-硝基米诺环素硫酸盐反应混合物转移至440kg(4.2份)甲醇中，同时维持批料温度在-20至-10℃、搅拌速率为130RPM。
将淬灭的批料调节至4至10℃，采用50psig氢气和52kg(0.5份)披钯炭(湿10％(w/w))还原为9-氨基米诺环素硫酸盐。氢化反应花费5小时，导致没有可测得的原料。将9-氨基米诺环素硫酸盐反应混合物过滤以除去催化剂，历经30分钟淬灭入17-23℃的1241kg(12份)IPA/537kg(5.2份)庚烷溶液中。然后将所得混合物冷却至-18至-12℃并搅拌1小时。
将所得9-氨基米诺环素硫酸盐浆状液分两批在Nutsche滤器上过滤，用总共3.6份预冷至0-6℃的IPA/庚烷(2∶1)v/v和506kg(4.9份)冷庚烷洗涤。两批的过滤和洗涤花费99小时(由于滤器尺寸的限制分两批过滤)。将9-氨基米诺环素硫酸盐湿滤饼溶于150kg(1.4份)0-6℃的注射用水(USP)中，分离出上层有机层作为废液。
将25.7kg(0.3份)盐酸20°Be加入0-6℃的9-氨基米诺环素硫酸盐溶液中，以供转化为9-氨基米诺环素HCl。将28％氢氧化铵加入反应混合物中，获得批料的pH为4.0±0.2；这花费49.5kg(0.48份)。将0.15kg亚硫酸钠(0.0014份)加入反应混合物中。
将批料用5g 9-氨基米诺环素HCl进行接种，搅拌3小时，同时采用28％氢氧化铵(花费0.05份)维持pH为4.0±0.2。将批料在Nutsche滤器上过滤，用1份预冷至2-8℃的注射用水(pH调节至4.0)洗涤，然后用0.2份异丙醇(预冷至2-8℃)洗涤，在NMT上于50℃干燥至NMT的LOD为10.0％和NMT的水份含量为8.0％。
分离出63.1kg 9-氨基米诺环素HCl，由米诺环素HCl开始的产率为59％。
下表4列出了比较数据。
表4
  批次 规模(米诺环素HCl的kg数)  强度 强度校正的产率 总杂质 最大单项杂质 差向异构体 循环时间1
(实施例3) 30kg  84.1％ 40.3％ 4.49％ 2.76％ 2.76％ 8天
(实施例1的化合物) 52kg  90.4％ 37.0％ 6.45％ 0.84％ 1.75％ 24天
52kg  87.9％ 27.2％ 9.72％ 3.73％ 3.88％ 25天
(实施例2或3的化合物) 104kg  86.4％ 48％2 10.79％ 0.63％ 3.18％ 33天3
 87.8％ 9.31％ 0.57％ 2.46％
(实施例4或5) 104kg  87.7％ 57％ 3.5％ 1.2％ 0.72％ 14天
1循环时间是由米诺环素.HCl至9-氨基米诺环素HCl。
2第一批和第二批收获物的组合产率。
3不包括在加工期间的7天工厂停工，包括加工第二批收获物的时间。
表4显示，在未分离情况下的反应混合物的氢化产生了具有较低量杂质和C4-差向异构体的产物。
酰化
HPLC分析在下述条件下进行：
柱： Luna C8 5μm，15×0.46cm
流动相： 80％(0.05M KH2PO4+10mL三乙胺/升(磷酸盐+H3PO4至pH6.2)/20％乙腈+0.5g NaEDTA
流速 1.0mL/min
检测 250nm
实施例1
N-叔丁基甘氨酸盐酸盐
在45-50℃下，向叔丁胺(1.57L)和甲苯(1.35L)的混合物中加入溴乙酸叔丁酯(420mL)。将混合物在50-60℃下搅拌1小时，温度历经1小时增加至75℃。在75℃下2小时后，将混合物冷却至-12±3℃，静置1小时。过滤收集固体，通过蒸馏(30-40℃，25-35mmHg)浓缩滤液至体积为825mL。将所得浓缩液冷却至20-25℃，加入6N HCl(1.45kg)。3小时后，使相分离，水相通过蒸馏(30-40℃，25-35mmHg)浓缩至体积为590mL。加入异丙醇(2.4L)，混合物通过蒸馏(15-20℃，10-20mmHg)浓缩至体积为990mL。将所得浆状液历经30分钟冷却至-12±3℃，静置1小时。过滤收集固体，用i-PrOH洗涤，干燥24小时(45±3℃，10mmHg)，得到(407.9g，86％)所需产物。
实施例2
N-叔丁基甘氨酰氯盐酸盐
历经20分钟向经过碾磨的N-叔丁基甘氨酸盐酸盐(250.0g)、甲苯(1.14L)、DMF(7.1g)中加入亚硫酰氯(143mL)。使混合物温度为80-85℃并在搅拌下加热3小时。冷却至20℃后，在N2下过滤收集固体，用甲苯洗涤，干燥16小时(40℃，10mmHg)，得到所需产物(260.4g，93.8％)。HPLC面积％的纯度：98.12％。
实施例3
替加环素
历经15分钟在搅拌下向9-氨基米诺环素.HCl(140.0g)和冷(0-4℃)水(840mL)的混合物中加入N-叔丁基甘氨酰氯盐酸盐(154.0g)。将混合物在0-4℃下搅拌1-3小时。加入氢氧化铵(126g，30％)使pH为7.2，同时维持温度为0-10℃。加入甲醇(930mL)和CH2Cl2(840mL)，混合物在20-25℃下搅拌1小时，通过加入氢氧化铵(13.5g，30％)维持pH为7.2。使相分离，将固体与有机层合并。用CH2Cl2(1×840mL，3×420mL)萃取水层，混合物的pH在每次萃取期间调节至7.2。向合并的有机层中加入甲醇(200mL)，得到溶液。用水洗涤溶液(2×140mL)，然后在搅拌下经硫酸钠(140g)干燥30分钟。过滤混合物，通过蒸馏(20℃，15-25mmHg)浓缩滤液至体积为425mL。向该混合物中加入CH2Cl2(1.4L)，重复蒸馏两次。将所得混悬液冷却至0-2℃，搅拌1小时。过滤收集固体，用0-5℃的CH2Cl2(2×150mL)洗涤，干燥24小时(65-70℃，10mmHg)，得到所需产物(120.0g，75％)。HPLC面积％的纯度：98.9％和C-4差向异构体0.12％。
实施例3A
替加环素
历经50分钟在搅拌下向9-氨基米诺环素.HCl(100.0g)和冷(0-4℃)水(600mL)的混合物中加入N-叔丁基甘氨酰氯盐酸盐(110.0g)。将混合物在0-4℃下搅拌1.5小时。加入氢氧化铵(112g，28％)使pH为7.2，同时维持温度为0-5℃。加入二氯甲烷(600ml)，然后加入甲醇(440mL)，混合物在0-5℃下搅拌30分钟，同时通过加入氢氧化铵(10.0g，28％)维持pH为7.2。历经15分钟将混合物加热至20-25℃。加入甲醇(244ml)，使相分离。用CH2Cl2(1×600mL，3×300mL)萃取水层，混合物的pH在每次萃取期间调节至7.2。向合并的有机层中加入甲醇(144mL)，得到溶液。用水洗涤溶液(2×100mL)，然后在搅拌下经硫酸钠(100g)干燥30分钟。过滤混合物，通过蒸馏(20℃，80-120mmHg)浓缩滤液至体积为400mL。向混合物中加入CH2Cl2(1.0L)，重复蒸馏量次。将所得混悬液冷却至0-2℃，搅拌1小时。过滤收集固体，用0-5℃的CH2Cl2(2×110mL)洗涤，干燥(65-70℃，于20mmHg进行18小时，然后于3-5mmHg进行16小时)，得到所需产物(82.4g，71.7％)。HPLC面积％的纯度：98.5％和C-4差向异构体0.28％。
实施例4
N-叔丁基甘氨酰氯盐酸盐
将叔丁胺(88g)溶于300mL甲苯中。将混合物加热至45-50℃，历经1小时加入117.5g溴乙酸叔丁酯，同时维持温度50-60℃。将反应物于75℃加热2小时。然后将反应混合物冷却至12-15℃，搅拌1小时。滤出固体，用冷甲苯洗涤。弃去固体，其为叔丁胺氢溴酸盐。将滤液冷却至10-12℃，通入HCl气体0.5小时。将混合物在10-12℃下搅拌3小时，然后过滤收集产物，用冷甲苯洗涤。将产物在真空下于40-50℃干燥，获得107g N-叔丁基甘氨酸盐酸盐。MS：m/z 187(M+)
将来自如上述制备的材料的N-叔丁基甘氨酸盐酸盐(7g)加入35mL甲苯中。加入亚硫酰氯(11.6mL)，将浆状液在75-80℃下加热1小时。将混悬液冷却至20℃，过滤收集固体，用2×15mL甲苯洗涤。将所得固体在真空中于40℃干燥，获得4.4g(产率65％)产物，保护其免于与潮湿接触，并立即用于下一步骤。
实施例5
替加环素
在0-5℃下，将9-氨基米诺环素(10.00g)分批加入60mL水中。分批加入叔丁基甘氨酰氯盐酸盐(10.98g)，保持温度为0-5℃。搅拌40-60分钟后，向反应混合物中滴加30％氢氧化铵以调节pH至7.2，同时保持温度在0-5℃。向溶液中加入83mL甲醇，然后加入60mL二氯甲烷。搅拌15分钟后，使相分离。水相用4×40mL二氯甲烷萃取，在每次萃取之前调节pH至7.2。向合并的有机物中加入10mL甲醇，溶液经硫酸钠干燥。过滤后，将溶液浓缩，得到混悬液(净重51g)。将混悬液在5-10℃下搅拌1小时，然后过滤。用2×10mL冷二氯甲烷洗涤固体，然后干燥，获得8.80g产物(产率76.8％)。HPLC面积％的纯度：98.4％和C-4差向异构体0.1％。MS(FAB)：m/z 586(M+H)；585(M+)。
实施例6
N-叔丁基甘氨酰氯盐酸盐
将叔丁胺(1.5kg)溶于1.35L甲苯中。将混合物加热至45-50℃，历经1小时加入548g溴乙酸叔丁酯，同时维持温度为50-60℃。将混合物在75℃下加热3小时。然后将反应混合物冷却至12-15℃，搅拌1小时。滤出固体，用冷甲苯洗涤。弃去固体，其为叔丁胺氢溴酸盐。通过蒸馏除去溶剂将滤液浓缩至～800mL。将浓缩物冷却至25℃，向混合物中加入900mL 6N HCl。于20-25℃搅拌3小时后，使相分离。弃去有机相，水相浓缩至体积为600mL。向浓缩物中加入异丙醇(2.4L)。将浆状液冷却至-12至-9℃，并维持0.5小时。过滤收集产物，用冷异丙醇洗涤，然后在真空和40-50℃下干燥，获得408g固体。通过NMR测定纯度＞95％。MS：m/z 187(M+)。
将来自如上述制备的材料的N-叔丁基甘氨酸盐酸盐(250g)加入1.3L甲苯和7.5mL DMF中。加入亚硫酰氯(143mL)，将浆状液在80-85℃下加热3-4小时。将混悬液冷却至20℃，过滤收集固体，用2×250mL甲苯洗涤。在真空和40℃下干燥固体，获得260g(产率82％)的产物。HPLC面积％的纯度：98.2％
实施例7
替加环素
在0-4℃下，将9-氨基米诺环素.HCl(140.0g)分批加入840mL水中。历经15分钟在充分搅拌下加入叔丁基甘氨酰氯盐酸盐(154g)，同时维持温度为0-4℃。将溶剂搅拌1-3小时。用30％氢氧化铵将混合物的pH调节至7.2±0.2，同时维持温度为0-10℃。将甲醇(930mL)和840mL二氯甲烷加入溶液中，其在20-25℃下搅拌1小时。分离相。水相用3×600mL二氯甲烷萃取，合并有机相，干燥，浓缩至体积为约500mL。将所得混悬液于0-2℃冷却1小时。过滤并干燥固体，获得120g产物(产率75％)。HPLC面积％的纯度：98％，C-4差向异构体0.1％。MS(FAB)：m/z 586(M+H)；585(M+)。
实施例8
吡咯烷基乙酸盐酸盐
将吡咯烷(14.2g)溶于40mL甲基叔丁基醚中。将溶液冷却至0至-5℃。在搅拌下滴加溴乙酸苄基酯(22.9g)。将浓稠白色浆状液在0-5℃下搅拌0.5小时。过滤除去固体，用甲基叔丁基醚洗涤。将滤液浓缩，获得21.3g乙酸吡咯烷基苄基酯。将苄基酯(21.0g)溶于200mL甲醇中，加入4.0g 10％Pd/C催化剂(湿50％)。将溶液在40psi下氢化6小时。滤除催化剂，用甲醇洗涤。浓缩滤液，获得11.8g吡咯烷基乙酸，为无色油。使15.8g吡咯烷基乙酸在15mL甲基-叔丁基醚中形成浆状液。加入乙腈(15mL)，将混悬液冷却至0-5℃。搅拌下加入乙醚HCl(120mL，1.0M)。过滤所得白色沉淀，用甲基叔丁基醚洗涤，干燥，获得15g吡咯烷基乙酸盐酸盐。GC/MS面积％的纯度：98％。MS：m/z 129(M+)。
实施例9
[4S-(4α，12aα)]-4，7-双(二甲基氨基)-9-[(吡咯烷基)乙酰基]氨 基]-1，4，4a，5，5a，6，11，12a-八氢-3，10，12，12a-四羟基-1，11-二氧代-2-并四苯-甲 酰胺
使吡咯烷基乙酸(7.7g)混悬于7mL乙腈中。冷却至0-5℃后，搅拌下缓慢加入5.3mL亚硫酰氯。将混悬液加热至55℃。将深色溶液于55℃保持0.5小时，然后冷却至室温，得到吡咯烷基乙酰氯盐酸盐。将如上文实施例4所述制备的9-氨基米诺环素盐酸盐(5.0g)混悬于5.0mL水中。将混悬液冷却至-15℃。向混悬液中滴加如上文所述制备的吡咯烷基乙酰氯盐酸盐的溶液，保持温度在22℃以下。将深色反应混合物在22-25℃下搅拌3小时。向混合物中加入水(2mL)，用30％氢氧化铵调节pH至6.5±0.2。用6×15mLCH2Cl2萃取溶液。合并有机萃取物，在40℃下浓缩。向浓缩物中加入无水乙醇(10mL)，将浆状液在5-7℃下搅拌1小时。过滤固体并在真空和40℃下干燥，得到3.5g产物。HPLC面积％的纯度：98.7％，C-4差向异构体0.4％。MS(FAB)：m/z 586(M+H)；585(M+)。
实施例10
替加环素
在10-15℃下，将9-氨基米诺环素(4.0g)分批加入10mL乙腈和5mLDMPU中。分批加入叔丁基甘氨酰氯盐酸盐(4.4g)，保持温度为10-15℃。搅拌2小时后，向反应混合物中缓慢加入10mL Me0H和17mL水，保持温度为10-17℃。将氢氧化铵(30％)滴加至反应混合物中以调节pH至7.2，保持温度为5-8℃。向溶液中加入15mL二氯甲烷。搅拌15分钟后，使相分离。用2×20mL二氯甲烷萃取水相，在每次萃取之前调节pH至7.2。向合并的有机物中加入700mg Norit CA-1(活性碳)和10g硫酸钠，然后过滤混合物。用2×20mL二氯甲烷洗涤滤饼。浓缩溶液，将所得混悬液在5-8℃下搅拌16小时。过滤后，用2×10mL冷二氯甲烷洗涤固体，然后干燥，获得2.3g产物(产率50％)。HPLC面积％的纯度：95.2％，C-4差向异构体：0.5％。MS(FAB)：m/z 586(M+H)；585(M+)。
实施例11-19
替加环素
实施例11-19按照实施例10的操作，溶剂修改如下所示。
实施例     溶剂     产率     结果1
11 DMPU 50％ 纯度：95.2％；C-4差向异构体：0.5％；sm：3.35％
12     DMPU-H2O(1∶1) 48％ 纯度：98.1％；C-4差向异构体：0.5％；sm：0.7％
13 DMPU-MeCN    60-72％产率，6g规模 要求广泛的后处理
    14     THF     -- 反应“未进行完全”
    15     MeCN     -- “不完全反应”
    16     CH2Cl2     -- “不完全反应”
17     THF∶H2O(6∶1) -- 反应不成功
18 NMP -- 反应“在小规模良好”，“达到完全反应”
    19     DMF2     58％ 未知杂质：1.5％
1通过HPLC面积评估的纯度。sm＝原料9-氨基米诺环素。
2反应混合物用异丙醇-乙酸乙酯淬灭，然后在水和CH2Cl2之间分配。浓缩有机相，然后在分离产物前用甲苯稀释。
实施例20
N-叔丁基甘氨酰氯盐酸盐
向装配有机械搅拌器、热电偶、具有连接至30％(wt.)碱洗涤器的氮气管线的冷凝器和250mL压力均衡添加漏斗的5升多颈烧瓶中加入经过研磨的N-叔丁基甘氨酸盐酸盐(436g，2.60moles，d(0.5)＝103μm)、甲苯(1,958g，2,263mL)和N，N-二甲基甲酰胺(13.6g，14.4mL，0.19moles)。在20-23℃下，历经33分钟使用250mL添加漏斗将亚硫酰氯(405g，248mL，3.40moles)加入灰白色浆状液中。历经1小时将浆状液缓慢加热至80℃，然后于80℃搅拌3小时。3小时后，通过薄层色谱法测得反应完全(＜2％原料)。历经32分钟将橘黄色混悬液冷却至20℃，然后在15-20℃下搅拌32分钟。通过采用42号Whatman滤纸的15cm布氏漏斗真空过滤收集固体。在20-25℃用三份甲苯(每次洗涤用272g，314mL)洗涤滤饼。将湿滤饼在氮气保护下抽滤干燥20分钟。然后在烘箱中以23mmHg真空和38℃下将产物干燥21.2小时，产生干燥失重为1.23％。所得叔丁胺乙酰氯HCl的重量＝462g，GC强度＝91.0％，IR鉴定＝阳性。由叔丁胺乙酸HCl开始的产率＝96％。对产物和原料强度进行校正的产率＝87％。
实施例21
N-叔丁基甘氨酰氯盐酸盐
向装配有机械搅拌器、热电偶、具有连接至25％(wt.)碱洗涤器的氮气管线的冷凝器和250mL压力均衡添加漏斗的5升多颈烧瓶中加入经过研磨的N-叔丁基甘氨酸盐酸盐(450g，2.68moles，d(0.5)＝664gm)、甲苯(2,863g，3,310mL)和N，N-二甲基甲酰胺(15g，15mL，0.21moles)。在19-22℃下，历经19分钟使用250mL添加漏斗将亚硫酰氯(422g，259mL，3.54moles)加入灰白色浆状液中。历经7.1小时将浆状液缓慢加热至79℃，然后于79-82℃搅拌44小时。于3小时通过薄层色谱法(TLC)检查反应，发现反应未完全。加入另外的26mL(42g，0.35moles)亚硫酰氯。总共27小时后，通过TLC测得反应仍未完全，加入另外的26mL(42g，0.35moles)亚硫酰氯。总共44小时后，在79-82℃下通过TLC测得反应完全(＜4％的起始叔丁胺乙酸HCl)。历经17分钟将深棕色混悬液冷却至25℃，然后在21-25℃搅拌37分钟。通过2升粗玻璃烧结漏斗真空过滤收集固体。在20-25℃用六份甲苯(每次洗涤用282g，325mL)洗涤滤饼。将湿滤饼在氮气保护下抽滤干燥16分钟。然后在烘箱中以23mmHg真空和38℃下将产物干燥26.1小时，产生干燥失重为0.75％。所得叔丁胺乙酰氯HCl的重量＝395g，GC强度＝89.5％，IR鉴定＝阳性。由叔丁胺乙酸HCl开始的产率＝79％。对产物和原料强度进行校正的产率＝71％。
实施例22
替加环素
在0至6℃下，将9-氨基米诺环素HCl(43.0kg)溶于258kg(6.0份)注射用水中。将N-叔丁基甘氨酰氯HCl(47.3kg，1.1份，3.01当量)缓慢加入批料溶液中，同时维持批料温度为0至6℃。将反应混合物搅拌1小时，测定含有0.2％原料(不需要另外的N-叔丁基甘氨酰氯HCl)。然后采用32kg(0.7份)28％氢氧化铵和2kg试剂盐酸(回调过量状况)使GAR-936反应混合物的pH为7.2±0.2。初始pH等于0.42且最终pH等于7.34。在0至7℃将二氯甲烷(342kg，8份)和148kg(3.4份)甲醇加入反应混合物中。由于pH为7.09，因此不需要调节。将批料温热至19-25℃。加入甲醇(83kg，1.9份)，分离下部有机相。然后用1×342kg(8份)和3×172kg(4份)二氯甲烷将保留在水相中的产物萃取至有机相中，同时用28％氢氧化铵维持pH为7.2±0.2。向所得二氯甲烷/甲醇溶液中加入甲醇(49kg，1.14份)，用2×43kg(1份)注射用水洗涤，然后用43kg(1份)硫酸钠干燥。然后进行三次真空蒸馏以除去甲醇，在第二次和第三次蒸馏之前加入568kg(13.2份)二氯甲烷。母液中甲醇的残余水平为0.21％。过滤批料，用2×60kg(1.4份)预冷(0至6℃)的二氯甲烷洗涤。所得粗物质未进行干燥，而是以湿滤饼(72.5kg，由干燥失重计算的干重为38.2kg)形式分离，由9-氨基米诺环素HCl开始的产率为77％。湿滤饼分析结果：米诺环素＝1.26％；最大单项杂质＝0.37％，C-4差向异构体＝0.50％。
实施例23
替加环素
在0至6℃下，将9-氨基米诺环素HCl(61.0kg)溶于258kg(6.0份)注射用水中。将N-叔丁基甘氨酰氯HCl(67.1kg，1.1份，3.01当量)缓慢加入批料溶液中，同时维持批料温度为0至6℃。将反应混合物搅拌3.5小时，测定含有0.13％原料(不需要另外的N-叔丁基甘氨酰氯HCl)。然后采用45kg(0.7份)28％氢氧化铵使反应混合物的pH为7.2±0.2。初始pH等于0.82且最终pH等于7.07。在0至6℃将二氯甲烷(485kg，8份)和210kg(3.4份)甲醇加入反应混合物中。由于pH仍然在范围内(7.04)，因此不需要调节。将批料温热至19-25℃。加入甲醇(118kg，1.9份)，分离下部有机相。然后用1×485kg(8份)和3×244kg(4份)二氯甲烷将保留在水相中的产物萃取至有机相中，同时用28％氢氧化铵维持pH为7.2±0.2。向所得二氯甲烷/甲醇溶液中加入甲醇(70kg，1.14份)，然后用2×61kg(1份)注射用水洗涤，然后用61kg(1份)硫酸钠干燥。然后进行三次真空蒸馏以除去甲醇，在第二次和第三次蒸馏之前加入805kg(13.2份)二氯甲烷。母液中甲醇的残余水平为0.05％。过滤批料，用2×85kg(1.4份)预冷(0至6℃)的二氯甲烷洗涤。所得粗物质未进行干燥，而是以湿滤饼(103kg，由干燥失重计算的干重为53.4kg)形式分离，由9-氨基米诺环素HCl开始的产率为76％。
比较例24
替加环素单盐酸盐
比较例24A：9-氯乙酰氨基米诺环素
将二氯甲烷(1.3L)在装配有机械搅拌器、温度计和1升添加漏斗的3升圆底烧瓶中冷却至0-2℃。搅拌下分批加入重结晶的9-氨基米诺环素盐酸盐(400g)。历经10分钟加入三乙胺(428mL)，同时保持温度在0-2℃之间。将反应混合物搅拌10分钟，然后冷却至-22℃。然后以使得温度上升不超过5℃的速率加入280g氯乙酸酐在540mL二氯甲烷中的溶液。使用另外的132mL二氯甲烷冲洗添加漏斗。在添加酸酐开始后15分钟，通过HPLC分析反应混合物。当原料的存在量低于2％时，用680mL 0.05M碳酸氢钠溶液使反应物淬灭。搅拌混合物15分钟，然后转移至5升分液漏斗中。使相分离。分离二氯甲烷相，用另外的680mL 0.05M碳酸氢钠溶液洗涤。将经洗涤的二氯甲烷溶液滴加至17升正庚烷和异丙醇的10∶1混合物(15.4升正庚烷和1.54升异丙醇)中。将浆状液搅拌5分钟，然后静置10分钟。倾析上层液，经粗多孔玻璃烧结漏斗过滤沉淀物。用2L 10∶1正庚烷∶异丙醇洗涤固体。将固体在真空和40℃下干燥，得到550g粗产物。
比较例24B：替加环素
在装配有搅拌器和温度计的1升双颈圆底烧瓶中，于室温(25-28℃)在有效的搅拌下将9-氯乙酰氨基米诺环素粗品(100g)缓慢加入500mL叔丁胺中。加入碘化钠(10g)，将反应混合物于室温搅拌7.5小时。通过HPLC监测反应，当残余＜2％的原料时，加入100mL甲醇，并在旋转蒸发仪上于40℃除去溶剂。向残余物中加入420mL甲醇和680mL水。将溶液冷却至0-2℃，用浓HCl(91ml)调节至pH 7.2，得到体积为1300mL的反应混合物。用水稀释为6.5L，用浓HCl(12mL)调节至pH至4.0-4.2。向溶液中加入经洗涤的Amberchrom(CG161 cd)(860g)，将混合物搅拌30分钟，调节pH至4.0-4.2。过滤除去树脂，通过HPLC分析废水溶液中的产物，于4-8℃储存。将树脂在4.8L的20％甲醇在水中的溶液(4L甲醇+16L水)中形成浆状液。搅拌混悬液15分钟，调节pH 4.0-4.2。过滤除去树脂，分析滤液中的产物。用4.8L的20％甲醇的水溶液重复树脂萃取3次。合并所有的树脂萃取物和来自上述的废水溶液，用30％氢氧化铵调节pH至7.0-7.2。用6×2.8L二氯甲烷萃取水溶液，在萃取之间调节pH至7.0-7.2。将合并的二氯甲烷萃取物经250g无水硫酸钠过滤，浓缩至500mL，冷却至0-3℃。在产物结晶后，将浆状液于0-3℃搅拌1小时。过滤固体，用2×50mL冷二氯甲烷洗涤，在40℃和真空下干燥，获得26g固体。
比较例24C：替加环素单盐酸盐
在搅拌下，将替加环素(49g，0.084moles)分批溶于500mL注射用水中。经中型多孔漏斗过滤溶液，用420mL注射用水洗涤。将溶液冷却至0-2℃，滴加5.6mL浓HCl，同时维持温度在0-2℃之间。初始pH为8.0，最终pH为6.0。通过将样品于-30℃冷冻和于-15℃冷冻干燥来冷冻干燥溶液。将储存温度升高至21℃达2小时。研磨所得固体(49.6g)，于4-5℃储存。元素分析：C(理论值52.92％，实测值51.75％)；H(理论值6.73％，实测值6.75％)；N(理论值10.65％，实测值10.32％)；Cl(理论值5.4％，实测值5.5％)。
比较例25
替加环素单盐酸盐
比较例25A：9-氯乙酰氨基米诺环素
将二氯甲烷(325ml)冷却至-5至0℃，历经10分钟分批加入9-氨基米诺环素盐酸盐(100g)。加入三乙胺(77.6g)，同时保持温度为-10至-5℃。通过于20-25℃搅拌制得97％氯乙酸酐(70g)在二氯甲烷(133mL)中的溶液，并在45分钟内加入反应混合物中，同时维持混合物温度为-10至-2℃。用31mL二氯甲烷洗涤含有氯乙酸酐溶液的烧瓶，将洗涤液加入反应混合物中。搅拌30分钟后，通过HPLC分析反应物以确定反应是否完全。历经30分钟加入碳酸氢钠水溶液(185mL，0.05M)，同时维持反应混合物温度为0至5℃。搅拌10分钟后，使各层分离，将硫酸钠(15g)加入有机层中。将混合物于0至5℃搅拌15分钟，过滤。用二氯甲烷(2×38mL)冲洗所得滤饼，历经20分钟将合并的滤液转移至4.19L 10∶1庚烷∶异丙醇中，然后用15mL二氯甲烷冲洗滤液烧瓶。将所得混悬液于20至25℃搅拌15分钟，然后过滤。滤饼用680mL 10∶1庚烷∶异丙醇冲洗，于37至40℃(5-10mmHg)干燥24小时。HPLC面积％的纯度：78.1。
比较例25B：替加环素
在装配有搅拌器、温度计和冷凝器的2升多颈圆底烧瓶中，在剧烈搅拌下于0-10℃将9-氯乙酰氨基米诺环素(100g)加入483mL叔丁胺中。加入碘化钠(16g)，于33-38℃搅拌反应混合物4小时。反应混合物通过HPLC分析反应完全，然后冷却至5-10℃。历经10分钟加入甲醇(300mL)，然后通过蒸馏(10-17℃，68mmHg)浓缩反应溶液至350mL。将第二部分甲醇(600mL)加入浓缩物中，通过蒸馏浓缩混合物至350mL。加入甲醇(46mL)和冷水(565mL)，同时维持反应温度低于30℃。将溶液冷却至0-5℃，用100mL HCl 20°Be调节pH至4.0。将溶液转移至5升多颈烧瓶中，用500mL水冲洗，然后用1升水稀释。于0-5℃搅拌1小时后，加入经洗涤的Amberchrom(CG161)树脂3，将所得混悬液于20-25℃搅拌30分钟。过滤混悬液，将所得湿滤饼加入340mL 5∶1水∶甲醇溶液中。将滤液放置一旁。于20-25℃搅拌30分钟后，过滤混悬液，将所得湿滤饼加入第二份340mL5∶1水∶甲醇溶液中。将该第二份滤液放置一旁。过滤混悬液，将所得湿滤饼加入第三份340mL 5∶1水∶甲醇溶液中。过滤后，将第三份滤液与第一份和第二份滤液合并，冷却至0-5℃。用11mL 28％氢氧化铵将pH调节至7.0。将溶液于0-5℃搅拌16小时，同时酌情调节pH至7.0，于22-25℃下搅拌1小时，同时酌情调节pH至7.0。用二氯甲烷(5×980mL)萃取水溶液，对每次萃取而言调节pH至7.0。将合并的有机相转移至分液漏斗，分离水层。将有机层与100g硫酸钠合并，于20-25℃搅拌1小时。经硅藻土垫过滤混悬液，用250mL二氯甲烷冲洗滤饼。通过蒸馏(-5至5℃，150mmHg)浓缩滤液至150mL，然后于0-5℃冷却1小时。过滤所得混悬液，用0-5℃的二氯甲烷(2×30mL)洗涤滤饼。将湿滤饼于26-32℃在二氯甲烷(335mL)和甲醇(37mL)中搅拌，直至获得溶液。经硅藻土过滤溶液，用二氯甲烷(2×15mL)冲洗硅藻土，通过蒸馏(-5至5℃，150mmHg)浓缩至54mL。浓缩操作重复两次，首先加入335mL二氯甲烷并减少体积至55-70mL，然后加入254mL二氯甲烷并减少体积至90-105mL。将所得混悬液于0-5℃搅拌1小时，然后过滤，用-10℃的二氯甲烷(2×25mL)洗涤。将固体于35-40℃干燥16小时，然后于45-50℃干燥27小时。HPLC面积％的纯度：97.7％，C-4差向异构体1.23％。
                                                                      
3经洗涤的Amberchrom(CG161M)树脂如下制备：将183g过滤的匀化Amberchrom(CG161M)树脂加入340mL 5∶1水∶甲醇溶液中。于22-25℃搅拌1小时后，过滤混悬液，获得湿滤饼，将其抽滤干燥。将湿滤饼于20℃在340mL 5∶1水∶甲醇溶液中搅拌1小时，然后过滤。再重复该操作一次，获得经洗涤的树脂。
纯化
实施例1
替加环素
搅拌替加环素粗品(110.0g)与乙酸甲酯(1.65L)的混合物，加热至30-35℃，历经15分钟加入甲醇(550mL)。于30-35℃保持后，在硅藻土(36g)上过滤温热溶液，滤饼用乙酸甲酯(2×106g)洗涤。通过蒸馏(20℃，150mmHg)浓缩滤液至550mL。加入乙酸甲酯(1.1L)，通过蒸馏(20℃，150mmHg)将所得混悬液浓缩至550mL。重复该步骤，然后将浓缩物冷却至0-4℃达1小时。过滤收集所得固体，用0-5℃乙酸甲酯(2×150mL)洗涤。将固体在真空中干燥(65-70℃，10mmHg)100小时，获得98.0g(产率89.1％)所需产物。HPLC面积％的纯度：98.8％和C-4差向异构体0.55％。
实施例2
替加环素
在0-4℃下，将9-氨基米诺环素.HCl(140.0g)分批加入840mL水中。历经15分钟，在充分搅拌下加入叔丁基甘氨酰氯盐酸盐(154g)，同时维持温度为0-4℃。将溶液搅拌1-3小时。用30％氢氧化铵将混合物的pH调节至7.2±0.2，同时维持温度为0-10℃。将甲醇(930mL)和840mL二氯甲烷加入溶液中，其在20-25℃下搅拌1小时。使相分离。用3×600mL二氯甲烷萃取水相，合并有机相，干燥，浓缩至体积为约500mL。将所得混悬液冷却至0-2℃达1小时。过滤固体，干燥，获得120g产物(产率75％)。HPLC面积％的纯度：98％，C-4差向异构体0.1％。MS(FAB)：m/z 586(M+H)；585(M+)。
实施例3
替加环素
将如实施例2所述制备的替加环素(15.00g)加入113mL丙酮和113mL甲醇中。将混悬液在20-25℃下搅拌1小时，然后冷却至0-2℃。搅拌1小时后，过滤混悬液，洗涤，获得12.55g产物(产率83.7％)。HPLC面积％的纯度＞99％，C-4差向异构体0.4％。
实施例4
替加环素
将如实施例2所述制备的替加环素(105g)加入800mL丙酮和800mL甲醇中。搅拌混悬液，加热至30-35℃达15分钟，然后冷却至20-25℃。于20-25℃保持1小时后，将混悬液冷却至0-4℃并保持1小时。过滤固体，洗涤，干燥，获得83g产物(产率79％)。HPLC面积％的纯度：＞99％，C-4差向异构体：0.4％。
实施例5
替加环素
向装配有机械搅拌器和氮气保护的1升多颈烧瓶中加入94.3g湿的替加环素粗品4、甲醇(305g，386mL)和丙酮(291g，368mL)。将混合物于16-23℃搅拌4小时。将浆状液通过具有#1 Whatman滤纸的9cm布氏漏斗过滤。将湿滤饼于20-25℃用甲醇(87g，110mL)洗涤。将湿滤饼在氮气保护下抽滤干燥0.1小时。将湿滤饼(75.3g)转回至1升多颈烧瓶中，加入甲醇(233g，295mL)和丙酮(244g，309mL)的溶液。将浆状液于15-20℃搅拌5.5小时。通过具有#1 Whatman滤纸的9cm布氏漏斗过滤浆状液。湿滤饼于18-24℃用甲醇(70g，88mL)洗涤。将湿滤饼在氮气保护下抽滤干燥0.1小时。将湿滤饼(59.0g)转回至1升多颈烧瓶中，加入甲醇(195g，247mL)和丙酮(187g，236mL)的溶液。在18-24℃下搅拌浆状液3小时。通过具有#1 Whatman滤纸的9cm布氏漏斗过滤浆状液。将湿滤饼于20-25℃用甲醇(55g，70mL)洗涤。将湿滤饼在氮气保护下抽滤干燥0.1小时。对湿滤饼(48.9g)取样进行高压液相色谱法(HPLC)分析(总杂质＝0.62％，米诺环素＝0.17％，C-4差向异构体＝0.35％，最大其它单项杂质＝0.05％)。
                                                                      
4替加环素粗品由从供应商Interchem获得的米诺环素盐酸盐制得
将湿滤饼(48.9g)转移至具有真空蒸馏设备的2升多颈烧瓶中。向湿滤饼中加入预混合的甲醇(90g，114mL)和二氯甲烷(1,023g，772mL)溶液中。将浆状液在15-20℃下搅拌，获得红色溶液。将溶液历经0.8小时在13-17℃和330mmHg真空下蒸馏至160mL，产生橘色浆状液。向2升烧瓶中加入二氯甲烷(818g，617mL)，将浆状液于6-13℃和817mmHg真空下历经0.7小时蒸馏至183mL。加入二氯甲烷(635g，479mL)，将浆状液在6-7℃和817mmHg真空中历经0.6小时重蒸馏至183mL。将所得橘色浆状液冷却至0-5℃，在搅拌下于0-5℃保持2小时。通过具有#1 Whatman滤纸的7cm布氏漏斗过滤浆状液。湿滤饼用两份0℃的69g(52mL)的二氯甲烷洗涤。在氮气保护下，将湿滤饼抽滤干燥5分钟。对湿滤饼(48.7g)取样进行HPLC分析(总杂质＝0.49％，米诺环素＝0.12％，C-4差向异构体＝0.32％，其它杂质＝0％)。然后将湿滤饼在25℃和＜10mmHg的真空下干燥57.5小时至二氯甲烷水平为2.2％，获得32.3g替加环素(产率34.2％)。
采用已经由从供应商Hovione和Nippon Kayaku获得的米诺环素.HCl制得的替加环素粗品进行该操作。表1和2给出了采用各米诺环素.HCl原料来源由上述方法获得的替加环素中杂质存在量的比较。这些表指明，该方法提供了具有低水平杂质的具有良好产率的替加环素。
表1
 米诺环素.HCl来源   替加环素加工阶段   最终替加环素中的总杂质(％) 所回收的米诺环素.HCl(％)   最终替加环素中的C-4差向异构体(％)
 Nippon Kayaku粗   粗     0.71     0.33     0.26
 Nippon Kayaku经纯化   经纯化     0.26     0.13     0.13
 Interchem粗   粗     0.66     0.17     0.29
 Interchem经纯化   经纯化     0.38     0.10     0.15
 Hovione粗   粗     0.64     0.18     0.32
 Hovione经纯化   经纯化     0.39     0.13     0.14
表2
测试 NipponKayaku  Interchem  Hovione
性状 橘色粉末  橘色粉末  橘色粉末
产率(g) 28.5  32.3  36.4
强度(％)1 100  99.6  99.6
总杂质(％)2 0.13 0.23 0.25
LSI(％)[RRT]3 brl4 0.13[0.64] 0.07[0.67]
米诺环素(％) 0.13 0.10 0.13
差向异构体(％) 0.13 0.15 0.14
二氯甲烷(％) 1.3 2.2 2.1
甲醇(％) 0.001 0.003 0.002
丙酮(％) 0.001 brl5 brl
庚烷(％) 0.001 brl6 brl
异丙醇(％) 0.002 brl7 brl
甲苯(ppm) brl8 brl brl
N，N-二甲基甲酰胺(ppm) brl9 brl brl
水(KF，％) 1.32 0.72 0.51
燃烧残余物(％) 0.039 0.005 0.014
IR 阳性 阳性 阳性
比旋光1(°) -219.4 -213.4 -218.7
结晶性 Conforms(一致) Conforms(一致) Conforms(一致)
产率(％) 21 26 24
产率(校正，％)10 24 30 27
自米诺环素的产率(％) 10 12 13
自米诺环素的产率(校正，％)10 11 13 14
1.以无水物为基础，不含溶剂。2.排除差向异构体。3.最大单项杂质(LSI)，排除C-4差向异构体和米诺环素。相对于GAR-936的相对保留时间(RRT)。4.brl：低于HPLC的报告限0.05％。5.0.0005％的brl。6.0.0003％的brl。7.0.0030％的brl(单样品)。8.2ppm的brl。9.63ppm的brl。10.对原料和产物强度校正。
实施例6
替加环素
将替加环素粗品的湿滤饼(72.5kg，干重38.2kg5)在191kg(5份)丙酮和191kg(5份)甲醇中搅拌并形成浆状液。然后将浆状液温热至30至36℃，立即冷却至19至25℃，于19至25℃保持2小时。然后将浆状液冷却至0至6℃，于0至6℃保持1小时。过滤和用2×34kg(0.9份)丙酮/甲醇(1∶1)洗涤后，然后测试湿滤饼中的米诺环素(0.23％)、9-氨基米诺环素(0％)、最大单项杂质(除了C-4差向异构体以外)(0.09％)。C-4差向异构体含量为1.12％。根据分析数据，未进行额外的重新制浆状液。向湿滤饼中加入440kg(11.5份)二氯甲烷和39.3kg(1.0份)甲醇，将混合物加热至30至36℃以溶解。将溶液批料经过0.3微米减热原过滤器和0.2微米澄清过滤器过滤。然后进行三次真空蒸馏以除去甲醇，在第二次和第三次蒸馏之前补添二氯甲烷(分别为440 kg和339kg)。残余的甲醇水平为0.3％。将批料冷却至0至6℃并搅拌1小时。过滤批料，用2×42.1kg(1.1份)预冷却(-13至-7℃)的二氯甲烷洗涤，在不超过60℃的温度下干燥至干燥失重＜2.5％。将物质研磨，获得22.3kg替加环素(产率58％)。HPLC面积％的纯度：98.2％，C-4差向异构体：1.55％，米诺环素0.1％，9-氨基米诺环素0％，最大单项其它杂质＝0.08％。
                                         
5由干燥失重数据计算的干重
实施例7
替加环素
将替加环素粗品的湿滤饼(103.5kg，干重53.4kg6)在191kg(5份)丙酮和191kg(5份)甲醇中搅拌并形成浆状液。然后将浆状液温热至30至36℃，立即冷却至19至25℃，于19至25℃保持2小时。然后将浆状液冷却至0至6℃，于0至6℃保持1小时。过滤和用2×34kg(0.9份)丙酮/甲醇(1∶1)洗涤后，然后测试湿滤饼中的米诺环素(0.12％)、9-氨基米诺环素(0％)、最大单项杂质(除了C-4差向异构体以外)(0.13％)。C-4差向异构体含量为0.37％。根据分析数据，未进行额外的重新制浆状液。向湿滤饼中加入440kg(11.7份)二氯甲烷和55.7kg(1.0份)甲醇，将混合物加热至30至36℃以溶解。将溶液批料经过0.3微米减热原过滤器和0.2微米澄清过滤器过滤。然后进行三次真空蒸馏以除去甲醇，在第二次和第三次蒸馏之前补添二氯甲烷(分别为624kg和481kg)。残余的甲醇水平为1.07％。将批料冷却至0至6℃并搅拌1小时。过滤批料，用3×59.7kg(1.1份)预冷却(-13至-7℃)的二氯甲烷洗涤，在不超过60℃的温度下干燥至干燥失重＜2.5％。将物质研磨，获得31.7kg替加环素，为第一批收获物。由结晶器中的剩余产物组成的第二批收获物提供了另外的2.5kg。这两批收获物代表自替加环素粗品开始的产率64％。
                                      
6由干燥失重数据计算的干重
虽然本发明已通过讨论本发明的实施方案及其非限制性的实施例进行了描述，但是本领域技术人员在阅读本说明书和权利要求书后可预见其它也落入本发明的预期范围内的实施方案和变体，因此本发明的范围应当仅由所附的权利要求书的范围来解释和定义。

Claims (60)

1.制备至少一种式4化合物或其盐的方法，
Figure S2006800269628C00011
其中R＝-NR3R4，其中R3和R4各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C4)烷基，
该方法包括：使至少一种还原剂与反应混合物浆状液合并，所述反应混合物浆状液包含由至少一种硝化剂和至少一种式2化合物或其盐之间的反应制备的中间体，
Figure S2006800269628C00012
2.根据权利要求1的方法，其中中间体为式3化合物或其盐
Figure S2006800269628C00013
3.根据权利要求1或2的方法，其中所述的至少一种还原剂在至少一种催化剂的存在下被提供。
4.根据权利要求3的方法，其中所述的至少一种催化剂选自稀土金属氧化物、含有第VIII族金属的催化剂以及含有第VIII族金属的催化剂的盐。
5.根据权利要求4的方法，其中所述的至少一种催化剂选自含有第VIII族金属的催化剂。
6.根据权利要求5的方法，其中含有第VIII族金属的催化剂包含钯。
7.根据权利要求6的方法，其中含有第VIII族金属的催化剂是披钯炭。
8.根据权利要求7的方法，其中披钯炭为湿形式。
9.根据权利要求7或8的方法，其中披钯炭催化剂相对于在与所述至少一种硝化剂反应前所存在的所述至少一种式2化合物的量而言以0.1份至1份的量存在。
10.根据权利要求1至9中任一项的方法，其中所述的至少一种还原剂为氢。
11.根据权利要求10的方法，其中氢以1至75psi的压力提供。
12.根据权利要求10的方法，其中氢以1至50psi的压力提供。
13.根据权利要求1至12中任一项的方法，其中在合并之前，将反应混合物与包含至少一种(C1-C8)醇的溶剂合并。
14.根据权利要求13的方法，其中所述的至少一种(C1-C8)醇选自甲醇和乙醇。
15.根据权利要求1至14中任一项的方法，其中合并在0℃至50℃的温度下进行。
16.根据权利要求15的方法，其中合并在20℃至40℃的温度下进行。
17.根据权利要求16的方法，其中合并在26℃至28℃的温度下进行。
18.根据权利要求1至17中任一项的方法，其中所述的至少一种硝化剂选自硝酸盐和硝酸。
19.根据权利要求1至18中任一项的方法，其中所述的至少一种式2化合物为选自盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、磷酸盐、硝酸盐、硫酸盐、乙酸盐、苯甲酸盐、柠檬酸盐、半胱氨酸盐、富马酸盐、乙醇酸盐、马来酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、硫酸盐和氯苯磺酸盐的盐。
20.根据权利要求1至19中任一项的方法，其中在合并之后，反应混合物以如通过高效液相色谱法所测定的低于2％的量包含所述的至少一种式2化合物。
21.根据权利要求1至19中任一项的方法，其中在合并之后，反应混合物以如通过高效液相色谱法所测定的低于1％的量包含所述的至少一种式2化合物。
22.根据权利要求1至21中任一项的方法，其中在合并之后，将反应混合物加入包含(C1-C8)支链醇和(C1-C8)烃的溶剂系统中。
23.根据权利要求22的方法，其中(C1-C8)支链醇为异丙醇。
24.根据权利要求22或23的方法，其中(C1-C8)烃选自己烷、庚烷和辛烷。
25.根据权利要求22至24中任一项的方法，其中在合并之后，将反应混合物在0℃至50℃的温度下加入溶剂系统中。
26.根据权利要求22至24中任一项的方法，其中在合并之后，将反应混合物在0℃至10℃的温度下加入溶剂系统中。
27.根据权利要求1至26中任一项的方法，进一步包括以固体组合物的形式分离所述的至少一种式4化合物。
28.根据权利要求27的方法，其中所述的至少一种式4化合物以盐形式被分离出。
29.根据权利要求28的方法，其中所述的至少一种式4化合物在亚硫酸钠存在下以盐形式被分离出。
30.根据权利要求27至29中任一项的方法，其中固体组合物以如通过高效液相色谱法所测定的低于10％的量包含式4的C4-差向异构体。
31.根据权利要求30的方法，其中固体组合物以如通过高效液相色谱法所测定的低于1％的量包含式4的C4-差向异构体。
32.根据权利要求30的方法，其中固体组合物以如通过高效液相色谱法所测定的低于0.5％的量包含式4的C4-差向异构体。
33.根据权利要求27-32中任一项的方法，其中固体组合物以如通过高效液相色谱法所测定的低于2％的量包含所述的至少一种式2化合物.
34.根据权利要求1至33中任一项的方法，其中所述的至少一种式2化合物以至少1克的量存在于反应混合物中。
35.制备至少一种式1化合物或其可药用盐的方法，
Figure S2006800269628C00041
其中R1和R2各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C6)烷基以及环烷基，或者R1和R2与N一起形成杂环；R为-NR3R4，其中R3和R4各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C4)烷基；且n为1-4，
该方法包括：
(a)使至少一种还原剂与反应混合物浆状液合并，所述反应混合物浆状液包含由至少一种硝化剂和至少一种式2化合物或其盐之间的反应制备的中间体，
Figure S2006800269628C00042
以形成第二中间体；和
(b)进一步使反应混合物中的第二中间体反应，以制备所述的至少一种式1化合物。
36.根据权利要求35的方法，其中R1为氢，R2为叔丁基，R3为甲基，R4为甲基，且n为1。
37.根据权利要求35的方法，其中所述的至少一种式1化合物为替加环素。
38.根据权利要求35的方法，其中所述的至少一种式1化合物为替加环素盐酸盐。
39.根据权利要求33至38中任一项的方法，其中浆状液中的第二中间体为至少一种式4化合物或其盐
Figure S2006800269628C00051
40.根据权利要求35至39中任一项的方法，其中(b)中的进一步反应包含使第二中间体酰化。
41.根据权利要求40的方法，其中在酰化之前，第二中间体作为盐被分离出。
42.制备至少一种式4化合物或其盐的方法，
Figure S2006800269628C00052
其中R＝-NR3R4，其中R3和R4各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C4)烷基，
该方法包括：使式3中间体或其盐还原，
Figure S2006800269628C00053
其中式3中间体存在于反应混合物浆状液中。
43.根据权利要求42的方法，其中还原包括使至少一种还原剂与反应混合物合并。
44.制备至少一种式1化合物或其可药用盐的方法，
Figure S2006800269628C00054
其中R1和R2各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C6)烷基以及环烷基，或者R1和R2与N一起形成杂环；R为-NR3R4，其中R3和R4各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C4)烷基；且n为1-4，
该方法包括：
(a)使至少一种硝化剂与至少一种式2化合物或其盐反应，以制备反应混合物，
(b)在未从反应混合物中分离任意固体的情况下，使至少一种还原剂与反应混合物合并，以制备中间体；和
(c)由中间体制备所述的至少一种式1化合物。
45.根据权利要求44的方法，其中R1为氢，R2为叔丁基，R3为甲基，R4为甲基，且n为1。
46.根据权利要求44的方法，其中所述的至少一种式1化合物为替加环素。
47.根据权利要求46的方法，其中所述的至少一种式1化合物为替加环素盐酸盐.
48.制备至少一种式1化合物或其可药用盐的方法，
Figure S2006800269628C00062
其中R1和R2自独立地选自氢、直链和支链(C1-C6)烷基以及环烷基，或者R1和R2与N一起形成杂环；R为-NR3R4，其中R3和R4各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C4)烷基；且n为1-4，
该方法包括：
(a)在氢存在下，使至少一种含有第VIII族金属的催化剂与反应混合物浆状液合并，所述反应混合物浆状液由至少一种硝化剂和至少一种式2化合物或其盐之间的反应制备，
Figure S2006800269628C00071
所述的至少一种含有第VIII族金属的催化剂相对于在与所述至少一种硝化剂反应前所存在的所述至少一种式2化合物的量而言以0.1份至1份的量存在。
49.根据权利要求48的方法，其中R1为氢，R2为叔丁基，R3为甲基，R4为甲基，且n为1。
50.根据权利要求48的方法，其中所述的至少一种式1化合物为替加环素。
51.根据权利要求50的方法，其中所述的至少一种式1化合物为替加环素盐酸盐。
52.通过权利要求1至51中任一项的方法制备的化合物或其盐。
53.根据权利要求52的化合物，其中R1为氢，R2为叔丁基，R3为甲基，R4为甲基，且n为1。
54.根据权利要求53的化合物，其中所述的至少一种式1化合物为替加环素。
55.组合物，包含通过权利要求1至51中任一项的方法制备的化合物或其盐。
56.根据权利要求55的组合物，还包含至少一种可药用载体。
57.根据权利要求56的组合物，其中R1为氢，R2为叔丁基，R3为甲基，R4为甲基，且n为1。
58.根据权利要求57的组合物，其中所述的至少一种式1化合物为替加环素。
59.包含至少一种式4化合物或其盐的组合物：
Figure S2006800269628C00081
其中R为-NR3R4，其中R3和R4各自独立地选自氢、直链和支链(C1-C4)烷基，其中式4的C4-差向异构体以如通过高效液相色谱法所测定的低于10％的量存在。
60.根据权利要求59的组合物，其中R1为氢，R2为叔丁基，R3为甲基，R4为甲基，且n为1。
CNA2006800269628A 2005-05-27 2006-05-25 替加环素及制备9-氨基米诺环素的方法 Pending CN101228113A (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US68514605P 2005-05-27 2005-05-27
US60/685,146 2005-05-27

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN101228113A true CN101228113A (zh) 2008-07-23

Family

ID=37025920

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNA2006800269628A Pending CN101228113A (zh) 2005-05-27 2006-05-25 替加环素及制备9-氨基米诺环素的方法

Country Status (21)

Country Link
US (1) US20070049563A1 (zh)
EP (1) EP1885686A2 (zh)
JP (1) JP2008545707A (zh)
KR (1) KR20080016894A (zh)
CN (1) CN101228113A (zh)
AR (1) AR057324A1 (zh)
AU (1) AU2006252686A1 (zh)
BR (1) BRPI0610649A2 (zh)
CA (1) CA2609649A1 (zh)
CR (1) CR9538A (zh)
EC (1) ECSP078056A (zh)
GT (1) GT200600222A (zh)
IL (1) IL187358A0 (zh)
MX (1) MX2007014734A (zh)
NI (1) NI200700300A (zh)
NO (1) NO20075998L (zh)
PE (1) PE20061447A1 (zh)
RU (1) RU2007143159A (zh)
TW (1) TW200716515A (zh)
WO (1) WO2006130500A2 (zh)
ZA (1) ZA200710154B (zh)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101919816A (zh) * 2010-07-02 2010-12-22 赵军旭 一种含有替加环素的注射用无菌分装制剂
CN101955443A (zh) * 2010-09-30 2011-01-26 浙江大学 一种替加环素中间体及其盐的制备方法
CN101973906A (zh) * 2010-09-27 2011-02-16 重庆福安药业(集团)股份有限公司 一种替加环素无定形态的制备方法
CN102617395A (zh) * 2011-01-29 2012-08-01 江苏正大天晴药业股份有限公司 一种甘氨酰环素类抗生素的制备方法
CN111855857A (zh) * 2020-07-30 2020-10-30 武汉药品医疗器械检验所 一种盐酸米诺环素及其杂质的高效液相色谱检测方法

Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AR057649A1 (es) * 2005-05-27 2007-12-12 Wyeth Corp Formas solidas cristalinas de tigeciclina y metodos para preparar las mismas
EP2007713A2 (en) * 2006-04-17 2008-12-31 Teva Pharmaceutical Industries Ltd Isolation of tetracycline derivatives
CA2649075A1 (en) * 2006-04-24 2007-11-08 Teva Pharmaceutical Industries Ltd. Tigeycline crystalline forms and processes for preparation thereof
US8198470B2 (en) * 2006-04-24 2012-06-12 Teva Pharmaceutical Industries Ltd. Crystalline form II of tigecycline and processes for preparation thereof
MX2008009520A (es) * 2006-11-29 2009-02-26 Teva Pharma Formas cristalinas de tigeciclina y procesos de preparacion de ellas.
EP2084126A1 (en) * 2006-11-30 2009-08-05 Teva Pharmaceutical Industries Ltd. Processes for preparation of 9-haloacetamidominocyclines
US20080214869A1 (en) * 2007-03-01 2008-09-04 Sergei Fine Processes for purification of tigecycline
WO2009052152A2 (en) * 2007-10-16 2009-04-23 Wyeth Tigecycline and methods of preparing intermediates
WO2009062963A1 (en) * 2007-11-14 2009-05-22 Sandoz Ag Crystalline forms of tigecycline hydrochloride
ES2528490T3 (es) 2008-12-18 2015-02-10 Sandoz Ag Forma cristalina C de dihidrocloruro de tigeciclina y métodos para su preparación
US20120059190A1 (en) 2009-03-12 2012-03-08 Wyeth Llc Novel nitration of tetracyclines
IT1393350B1 (it) * 2009-03-16 2012-04-20 Antibioticos Spa Processo di preparazione di tigeciclina
PL2327676T3 (pl) * 2009-11-26 2014-08-29 Sandoz Ag Reakcja związków organicznych z małymi ilościami wodoru
CN103044280B (zh) * 2012-12-20 2015-04-22 安徽悦康凯悦制药有限公司 替加环素的制备方法
WO2015071299A2 (en) 2013-11-12 2015-05-21 Galenicum Health S.L. Stable pharmaceutical compositions

Family Cites Families (49)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
USRE26271E (en) * 1967-09-26 Reductive alkylation process
US3026248A (en) * 1959-09-11 1962-03-20 Pfizer & Co C Thioglycerol and formaldehyde sulfoxylate stabilized tetracycline antibiotics in polyhydric alcohol solvents
US3043875A (en) * 1959-10-22 1962-07-10 Pfizer & Co C Halogenated tetracycline derivatives and processes for their preparation
FR1430859A (zh) * 1960-05-23 1966-05-25
US3338963A (en) * 1960-10-28 1967-08-29 American Cyanamid Co Tetracycline compounds
US3239499A (en) * 1961-05-19 1966-03-08 Pfizer & Co C Tetracycline derivative
US3502696A (en) * 1961-08-18 1970-03-24 Pfizer & Co C Antibacterial agents
US3148212A (en) * 1961-12-22 1964-09-08 American Cyanamid Co Reductive alkylation process
US3250809A (en) * 1962-09-06 1966-05-10 Pfizer & Co C 6-deoxy-6-demethyl-6-halomethylene tetracyclines and their 11a-chloro and fluoro derivatives
US3145228A (en) * 1962-09-06 1964-08-18 Pfizer & Co C 5-alkoxy-and 5-benzyloxy-tetracycline, derivatives and analogues thereof
US3250810A (en) * 1962-09-06 1966-05-10 Pfizer & Co C 6-hydroxy-6-halomethyl tetracyclines
US3219529A (en) * 1962-10-04 1965-11-23 American Cyanamid Co Stable tetracycline solutions
USRE26253E (en) * 1963-05-17 1967-08-15 And z-alkylamino-g-deoxytetracycline
US3397230A (en) * 1966-03-14 1968-08-13 American Cyanamid Co Nitration of tetracyclines
US3433834A (en) * 1966-03-14 1969-03-18 American Cyanamid Co Nitration of 11a-chloro tetracyclines
US3341585A (en) * 1966-05-06 1967-09-12 American Cyanamid Co Substituted 7-and/or 9-amino-6-deoxytetracyclines
US3849493A (en) * 1966-08-01 1974-11-19 Pfizer D-ring substituted 6-deoxytetracyclines
US3345410A (en) * 1966-12-01 1967-10-03 American Cyanamid Co Substituted 7- and/or 9-amino tetracyclines
US3373196A (en) * 1967-03-21 1968-03-12 American Cyanamid Co 7-and/or 9-(lower alkyl) amino-5a, 6-anhydrotetracyclines
US3373197A (en) * 1967-04-27 1968-03-12 American Cyanamid Co Substituted 6-epitetracyclines and 5a-epi-6-epitetracyclines
US3373198A (en) * 1967-04-27 1968-03-12 American Cyanamid Co Substituted 5a, 11a-dehydro-6-epitetracyclines
US3360561A (en) * 1967-06-19 1967-12-26 American Cyanamid Co Nitration of tetracyclines
US3518306A (en) * 1968-02-19 1970-06-30 American Cyanamid Co 7- and/or 9-(n-nitrosoalkylamino)-6-demethyl-6-deoxytetracyclines
US3579579A (en) * 1968-04-18 1971-05-18 American Cyanamid Co Substituted 7- and/or 9-amino-6-demethyl-6-deoxytetracyclines
US4038315A (en) * 1972-05-11 1977-07-26 American Cyanamid Company Isolation and recovery of calcium chloride complex of 7-dimethylamino-6-dimethyl l-6-deoxytetracycline hydrochloride
JPS5697277A (en) * 1980-01-07 1981-08-05 Takeda Chem Ind Ltd Thiazolidine derivative
US5202449A (en) * 1987-07-28 1993-04-13 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Process for purifying 7-dimethylamino-6-demethyl-6-deoxytetracycline
US5141960A (en) * 1991-06-25 1992-08-25 G. D. Searle & Co. Tricyclic glycinamide derivatives as anti-convulsants
US5494903A (en) * 1991-10-04 1996-02-27 American Cyanamid Company 7-substituted-9-substituted amino-6-demethyl-6-deoxytetracyclines
US5281628A (en) * 1991-10-04 1994-01-25 American Cyanamid Company 9-amino-7-(substituted)-6-demethyl-6-deoxytetracyclines
US5248797A (en) * 1992-08-13 1993-09-28 American Cyanamid Company Method for the production of 9-amino-6-demethyl-6-deoxytetracycline
SG47520A1 (en) * 1992-08-13 1998-04-17 American Cyanamid Co New method for the production of 9-amino-6-demethyl-6-deoxytetracycline
US5442059A (en) * 1992-08-13 1995-08-15 American Cyanamid Company 9-[(substituted glycyl)amido)]-6-demethyl-6-deoxytetracyclines
US5328902A (en) * 1992-08-13 1994-07-12 American Cyanamid Co. 7-(substituted)-9-[(substituted glycyl)amido]-6-demethyl-6-deoxytetracyclines
US5284963A (en) * 1992-08-13 1994-02-08 American Cyanamid Company Method of producing 7-(substituted)-9-[(substituted glycyl)-amidol]-6-demethyl-6-deoxytetra-cyclines
US5420272A (en) * 1992-08-13 1995-05-30 American Cyanamid Company 7-(substituted)-8-(substituted)-9-](substituted glycyl)amido]-6-demethyl-6-deoxytetracyclines
US5371076A (en) * 1993-04-02 1994-12-06 American Cyanamid Company 9-[(substituted glycyl)amido]-6-(substituted)-5-hydroxy-6-deoxytetracyclines
AU1279095A (en) * 1994-02-17 1995-09-04 Pfizer Inc. 9-(substituted amino)-alpha-6-deoxy-5-oxy tetracycline derivatives, their preparation and their use as antibiotics
US5675030A (en) * 1994-11-16 1997-10-07 American Cyanamid Company Method for selective extracting a 7-(hydrogen or substituted amino)-9- (substituted glycyl) amido!-6-demethyl-6-deoxytetracycline compound
US5843925A (en) * 1994-12-13 1998-12-01 American Cyanamid Company Methods for inhibiting angiogenesis, proliferation of endothelial or tumor cells and tumor growth
US6506740B1 (en) * 1998-11-18 2003-01-14 Robert A. Ashley 4-dedimethylaminotetracycline derivatives
US6946453B2 (en) * 1998-11-18 2005-09-20 Collagenex Pharmaceuticals, Inc. 4-dedimethylaminotracycline derivatives
EP1263442A1 (en) * 2000-01-24 2002-12-11 Trustees Of Tufts College TETRACYCLINE COMPOUNDS FOR TREATMENT OF i CRYPTOSPORIDIUM PARVUM /i RELATED DISORDERS
US6818634B2 (en) * 2000-03-31 2004-11-16 Paratek Pharmaceuticals, Inc. 7-and 9-carbamate, urea, thiourea, thiocarbamate, and heteroaryl-amino substituted tetracycline compounds
CA2415178C (en) * 2000-07-07 2010-05-25 Trustees Of Tufts College 9-substituted minocycline compounds
CA2415086A1 (en) * 2000-07-07 2002-01-17 Trustees Of Tufts College 7,8 and 9-substituted tetracycline compounds
JP2005505588A (ja) * 2001-10-05 2005-02-24 テトラジェネックス ファーマスーティカルズ インク テトラサイクリン誘導体、及びそれを使用する方法
UA83266C2 (en) * 2003-12-08 2008-06-25 Уайет Oxazole derivatives of tetracyclines
AR057033A1 (es) * 2005-05-27 2007-11-14 Wyeth Corp Tigeciclina y metodos para preparar 9-nitrominociclina

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101919816A (zh) * 2010-07-02 2010-12-22 赵军旭 一种含有替加环素的注射用无菌分装制剂
CN101919816B (zh) * 2010-07-02 2012-07-25 赵军旭 一种含有替加环素的注射用无菌分装制剂
CN101973906A (zh) * 2010-09-27 2011-02-16 重庆福安药业(集团)股份有限公司 一种替加环素无定形态的制备方法
CN101973906B (zh) * 2010-09-27 2014-03-19 重庆福安药业(集团)股份有限公司 一种替加环素无定形态的制备方法
CN101955443A (zh) * 2010-09-30 2011-01-26 浙江大学 一种替加环素中间体及其盐的制备方法
CN102617395A (zh) * 2011-01-29 2012-08-01 江苏正大天晴药业股份有限公司 一种甘氨酰环素类抗生素的制备方法
CN111855857A (zh) * 2020-07-30 2020-10-30 武汉药品医疗器械检验所 一种盐酸米诺环素及其杂质的高效液相色谱检测方法

Also Published As

Publication number Publication date
EP1885686A2 (en) 2008-02-13
KR20080016894A (ko) 2008-02-22
WO2006130500A3 (en) 2007-01-18
US20070049563A1 (en) 2007-03-01
ZA200710154B (en) 2009-05-27
MX2007014734A (es) 2008-02-15
WO2006130500A8 (en) 2008-01-10
CR9538A (es) 2008-02-20
JP2008545707A (ja) 2008-12-18
ECSP078056A (es) 2008-01-23
BRPI0610649A2 (pt) 2010-07-13
AU2006252686A1 (en) 2006-12-07
WO2006130500A2 (en) 2006-12-07
PE20061447A1 (es) 2007-01-22
NI200700300A (es) 2008-07-03
GT200600222A (es) 2007-01-12
CA2609649A1 (en) 2006-12-07
RU2007143159A (ru) 2009-07-10
IL187358A0 (en) 2008-04-13
TW200716515A (en) 2007-05-01
NO20075998L (no) 2008-02-19
AR057324A1 (es) 2007-11-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101228112A (zh) 替加环素及其制备方法
CN101228113A (zh) 替加环素及制备9-氨基米诺环素的方法
CN101228114A (zh) 纯化替加环素的方法
CN101228111A (zh) 替加环素和制备9-硝基米诺环素的方法
US20090099376A1 (en) Tigecycline and methods of preparing intermediates
EP2252579A2 (en) Antibiotic compounds
WO2022029796A1 (en) An improved process for the preparation of Tigecycline intermediate and process for the preparation of Tigecycline therefrom
WO2009062964A1 (en) Novel solvate
CN104230744A (zh) 一种替加环素原料药的生产方法
CN106565523A (zh) 制备替加环素的方法
KR20110009035A (ko) 1-메톡시-2-프로판올 및 물 또는 메탄올 중 요오딕사놀의 합성
KR20110009033A (ko) 메탄올 중 요오딕사놀의 합성
CA2710422A1 (en) Synthesis of iodixanol in 1-methoxy-2-propanol and water or methanol
BRPI0706517A2 (pt) processos para preparação de f 9-haloacetamidominociclinas

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Open date: 20080723